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SSH方法分离大剂量照射后小鼠骨髓差异表达EST序列
引用本文:饶亚岚,陈肖华,张军权,魏巍,董波,毛秉智.SSH方法分离大剂量照射后小鼠骨髓差异表达EST序列[J].中华放射医学与防护杂志,2003,23(3):163-166.
作者姓名:饶亚岚  陈肖华  张军权  魏巍  董波  毛秉智
作者单位:100850,北京放射医学研究所
基金项目:全军“十五”医药卫生科研基金资助项目 ( 0 1L0 18)
摘    要:目的 为探讨骨髓辐射损伤的分子机理,研究了整体照射条件下,辐射前后骨髓基因表达的变化。方法 小鼠7Gyγ射线照射后4h提取骨髓总RNA为实验方(tester),对照组动物骨髓总RNA为驱动方(driver);实验方、驱动方总RNA由SMART cDNA合成方法合成双链cDNA,进而由抑制消减杂交(SSH)方法获得消减杂交产物.消减杂交产物克隆到T载体建立消减文库;对部分克隆进行杂交筛选及序列比对。结果 消减杂交文库挑取800个克隆进行PCR扩增,阳性率约为86%;部分克隆经两轮杂交筛选获得14个差异片段;7个差异片段与鼠EST库已有序列高度相似,其余7个差异片段可能是新的EST序列。结论 大剂量照射后小鼠骨髓cDNA消减文库的建立以及部分差异表达EST的验证为进一步研究辐射相关差异表达基因奠定基础。

关 键 词:骨髓辐射损伤  抑制消减杂交法  基因表达  差异表达序列标签  动物实验
收稿时间:2002/9/27 0:00:00
修稿时间:2002年9月27日

Expressed sequence tags isolated from mouse bone marrow cells irradiated with high-dose gamma rays by suppression subtractive hybridization (SSH)
RAO Yalan CHEN Xiaohu,ZHANG Junquan.Expressed sequence tags isolated from mouse bone marrow cells irradiated with high-dose gamma rays by suppression subtractive hybridization (SSH)[J].Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection,2003,23(3):163-166.
Authors:RAO Yalan CHEN Xiaohu  ZHANG Junquan
Institution:RAO Yalan CHEN Xiaohua,ZHANG Junquan,et al.Beijing Institute of Radiation Medicine,Beijing 100850,China\,
Abstract:
Keywords:Mouse bone marrow  \  Ionizing radiation  \  Suppression subtractive hybridization  \  Expressed sequence tags
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