| MAGE-n的原核表达与分离纯化 |
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| 引用本文： | 黄亚渝,隋延仿,叶菁,董海龙,陈广生,张秀敏.MAGE-n的原核表达与分离纯化[J].免疫学杂志,2004,20(2):103-105,109. |
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| 作者姓名： | 黄亚渝 隋延仿 叶菁 董海龙 陈广生 张秀敏 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (30 2 71 4 64)，全军医药卫生科研基金(0 1Z0 84)重点资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建MAGE n的原核表达质粒 ,在大肠杆菌中进行表达 ,并通过谷胱甘肽巯基转移酶 (GlutathioneS trans ferse,GST)纯化系统进行分离纯化。方法 用ANTHEPROTV5 .0软件预测MAGE n的生物学特性 ,从中选择抗原性及特异性较强的一段。利用PCR方法扩增MAGE n基因片段 ,连入原核表达载体pGEX 4T 1,构建MAGE n的原核表达质粒pGEX MAGE n并测序。将该质粒转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化。结果 成功地扩增了MAGE n基因片段 ,测序结果表明与GenBank公布的序列一致 ,成功地构建了pGEX MAGE n原核表达质粒 ,含有该质粒的大肠杆菌经异丙基 β D 半乳糖苷 (Isopro pyl beta D thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后表达一Mr 约为 4 30 0 0的蛋白 ,经GST融合蛋白纯化系统纯化 ,得到了MAGE n的重组蛋白。结论 首次获得了新的肿瘤抗原MAGE n的重组蛋白 ,并进行分离纯化 ,为进一步研究MAGE n抗原在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础
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| 关 键 词： | 黑色素瘤抗原-n 原核表达 纯化 重组蛋白 |
| 文章编号： | 1000-8861(2004)02-0103-04 |
Prokaryotic expression and purification of the gene of MAGE-n |
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| HUANG Ya-yu,SUI Yan-fang,YE Jing,Dong Hai-long,CHEN Guang-sheng,ZHANG Xiu-min.Prokaryotic expression and purification of the gene of MAGE-n[J].Immunological Journal,2004,20(2):103-105,109. |
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| Authors: | HUANG Ya-yu SUI Yan-fang YE Jing Dong Hai-long CHEN Guang-sheng ZHANG Xiu-min |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MAGE-n Prokaryotic expression Purification Recombinant protein |
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