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人端粒酶逆转录酶基因启动子区的克隆及其真核表达载体的构建
引用本文:郭玉忠,李杰,姜国忠,王建民,薛乐勋. 人端粒酶逆转录酶基因启动子区的克隆及其真核表达载体的构建[J]. 郑州大学学报(医学版), 2004, 39(1): 44-47
作者姓名:郭玉忠  李杰  姜国忠  王建民  薛乐勋
作者单位:郑州大学细胞生物学研究室,郑州,450052;郑州大学细胞生物学研究室,郑州,450052;郑州大学细胞生物学研究室,郑州,450052;郑州大学细胞生物学研究室,郑州,450052;郑州大学细胞生物学研究室,郑州,450052
基金项目:河南省重大科技攻关基金资助项目  0 12 2 0 3 2 5 0 0,河南省杰出人才创新基金资助项目  0 2 2 10 0 190 0
摘    要:目的:构建人端粒酶逆转录酶基因启动子区的真核表达载体。方法:用核酸内切酶NotⅠ和KpnⅠ酶切报告基因GFP,插入pcDNA3.1( )载体,得到pcDNA3.1( )-GFP(PG)载体;用PCR方法扩增hTERT基因ATG上游的启动子序列,测序后用核酸内切酶BglⅡ和KpnⅠ酶切插入PG载体,得到pcDNA3.1( )-GFP—hTERT(PGT)载体。将PGT载体转染人食管癌EC9706细胞系,经G418筛选,荧光显微镜下观察。结果:克隆得到的启动子序列与文献相符,重组载体经酶切鉴定方向正确,含有人端粒酶逆转录酶基因启动子序列。经转染人食管癌EC9706细胞系,在荧光显微镜下观察到绿色的阳性克隆。结论:克隆的人端粒酶逆转录酶基因启动子序列在真核细胞中具有启动子活性。

关 键 词:人端粒酶逆转录酶  启动子  真核表达载体
修稿时间:2003-10-25

Cloning of human telomerase reverse transcriptase gene promoter and construction of its eukaryotic expression vector
GUO Yuzhong,LI Jie,JIANG Guozhong,WANG Jianmin,XUE Lexun Laboratory for Cell Biology,Zhengzhou University,Zhengzhou. Cloning of human telomerase reverse transcriptase gene promoter and construction of its eukaryotic expression vector[J]. Journal of Zhengzhou University: Med Sci, 2004, 39(1): 44-47
Authors:GUO Yuzhong  LI Jie  JIANG Guozhong  WANG Jianmin  XUE Lexun Laboratory for Cell Biology  Zhengzhou University  Zhengzhou
Affiliation:GUO Yuzhong,LI Jie,JIANG Guozhong,WANG Jianmin,XUE Lexun Laboratory for Cell Biology,Zhengzhou University,Zhengzhou 450052
Abstract:
Keywords:
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