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| 抗人精浆蛋白单链抗体的构建及表达 | |
| 引用本文： | 郝晓柯,武国军,白玉杰.抗人精浆蛋白单链抗体的构建及表达[J].中华泌尿外科杂志,1999,0(1):5-8. |
| 作者姓名： | 郝晓柯 武国军 白玉杰 |
| 作者单位： | 第四军医大学唐都医院中心实验室，第四军医大学生化教研室 |
| 基金项目： | 全军重点实验室研究基金 |
| 摘 要： | 目的构建抗人精浆蛋白单链抗体（γＳｍＳｃＦｖ），为进一步应用基因工程抗体研究打下基础。方法从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体γＳｍＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系Ｅ４Ｂ７中提取总ＲＮＡ，经ＲＴＰＣＲ分离获得了γＳｍＭｃＡｂ轻、重链可变区（ＶＬ、ＶＨ）基因，用连接肽将其构建成具有ＶＨＬｉｎｋｅｒＶＬ结构的单链抗体基因，并将构建的单链抗体基因克隆到融合蛋白表达载体ＰＧＥＸ４Ｔ１中进行表达。结果经测序表明，ＶＨ、ＶＬ及Ｌｉｎｋｅｒ的序列均正确。ＳｃＦｖ在大肠杆菌中的表达量约占菌体总蛋白的４０％。结论构建的抗人精浆蛋白单链抗体，为进一步制备基因工程抗体奠定了基础 |
| 关 键 词： | 前列腺肿瘤 基因 克隆 |
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