| Y-盒结合蛋白1短发夹环RNA真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 周磊磊,许文林,秦茹娟,唐华容,沈慧玲.Y-盒结合蛋白1短发夹环RNA真核表达载体的构建[J].江苏大学学报(医学版),2007,17(1):35-37,65. |
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| 作者姓名： | 周磊磊 许文林 秦茹娟 唐华容 沈慧玲 |
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| 作者单位： | 江苏大学附属人民医院中心实验室,江苏,镇江,212002;江苏大学附属人民医院肿瘤科,江苏,镇江,212002 |
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| 基金项目： | 江苏省卫生重大课题基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建Y-盒结合蛋白1(Y-box binding protein-1,YB-1)特异性短发夹环RNA(shRNA)真核表达载体.方法:采用人U6SnRNA启动子,分别把被9 bp序列间隔的19 bp长短的YB-1靶序列的反向重复序列,置于pGensil-1质粒载体中,构建成YB-1短发夹环RNA,产生重组质粒pGensil-1/U6/YBX11,pGensil-1/U6/YBX12及pGensil-1/U6/YBX13.分别用Pst Ⅰ和Sal Ⅰ酶切鉴定;并将经酶切鉴定正确后的重组质粒作测序分析.结果:YB-1的特异性shRNA片段被成功克隆进pGensil-1质粒中,Sal Ⅰ酶切鉴定可切出400 bp大小的片段,DNA测序分析显示,重组质粒shRNA编码序列与设计片断的序列完全一致.结论:成功构建了针对YB-1的特异性shRNA真核表达载体pGensil-1/U6/YBX11,pGensil-1/U6/YBX12及pGensil-1/U6/YBX13,为进一步研究其基因功能打下了基础.
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| 关 键 词： | RNA干扰 YB-1 短发夹环RNA U6SnRNA启动子 |
| 文章编号： | 1671-7783（2007）01-0035-03 |
| 收稿时间： | 2006-10-20 |
| 修稿时间： | 2006-10-20 |
Generation of eukaryotic expression vector of shRNA specific for Y-box binding protein-1 |
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| ZHOU Lei-lei,XU Wen-lin,QIN Ru-juan,TANG Hua-rong,SHEN Hui-lin.Generation of eukaryotic expression vector of shRNA specific for Y-box binding protein-1[J].Journal of Jiangsu University Medicine Edition,2007,17(1):35-37,65. |
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| Authors: | ZHOU Lei-lei XU Wen-lin QIN Ru-juan TANG Hua-rong SHEN Hui-lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference YB-1 short hairpin RNA U6SnRNA promoter |
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