| 人FUT3基因真核表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 岳丽玲,樊丽,刘吉成. 人FUT3基因真核表达载体的构建与表达[J]. 世界华人消化杂志, 2009, 17(31): 3210-3213 |
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| 作者姓名： | 岳丽玲 樊丽 刘吉成 |
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| 作者单位： | 齐齐哈尔医学院医药科学研究所,黑龙江省齐齐哈尔市,161006;黑龙江中医药大学,黑龙江省哈尔滨市,150040;齐齐哈尔医学院医药科学研究所,黑龙江省齐齐哈尔市,161006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目;No.30772751，黑龙江省青年科学资金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建增强型绿色荧光蛋白为报告基因的pEGFP-C1-FUT3真核表达载体,分析其在细胞系MDA-MB-231中的表达.方法:采用RT-PCR扩增FUT3全长基因片段,克隆至pMD18-T载体进行测序分析,将FUT3亚克隆至pEGFP-C1表达载体并酶切鉴定.利用脂质体将重组真核表达栽体pEGFP-C1-FUT3转染入人乳腺癌细胞MDA-MB-231中,经G418筛选获得稳定转染的细胞系,荧光显微镜观察及RT-PCR检测FUT3的表选.结果:成功获得人全长FUT3基因并构建了真核表达栽体pEGFP-C1-FUT3,体外转染MDA-MB-231细胞后荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达,半定量RT-PCR检出高水平表达的FUT3.结论:成功构建了增强型绿色荧光蛋白为报告基因的FUT3真核表达载体,并在MDA-MB-231中稳定表达,为进一步研究FUT3的生物学功能提供基础.
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| 关 键 词： | α 1 3-岩藻糖基转移酶Ⅲ 增强型绿色荧光蛋白 基因克隆 |
Construction of human FUT3 eukaryotic expression vector and its expression in human breast adenocarcinoma cells |
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| Li-Ling Yue,Li Fan,Ji-Cheng Liu. Construction of human FUT3 eukaryotic expression vector and its expression in human breast adenocarcinoma cells[J]. World Chinese Journal of Digestology, 2009, 17(31): 3210-3213 |
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| Authors: | Li-Ling Yue Li Fan Ji-Cheng Liu |
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