腺病毒5型knob蛋白的原核表达、纯化及其单克隆抗体的制备 |
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作者姓名: | 王鹏 王华茂 周敏 刘素霞 林志新 徐宇虹 李宗海 |
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作者单位: | 1. 上海交通大学生命科学技术学院,上海,200032 2. 上海市肿瘤研究所,癌基因及相关基因国家重点实验室,上海,200032 3. 上海交通大学生命科学技术学院,上海,200032;上海市肿瘤研究所,癌基因及相关基因国家重点实验室,上海,200032 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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摘 要: | 目的:表达、纯化腺病毒5型knob蛋白,并制备其单克隆抗体(mAb)。方法:克隆并表达腺病毒的knob蛋白,其氨基端带有6-His标签。纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb。结果:成功表达了knob蛋白。SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量(Mr)约为23000。获得了2株分泌针对knob的杂交瘤细胞系(8D7和6D4),其分泌的mAb的Ig亚类(型)均为IgG2b。ELISA检测,对应腹水mAb的效价分别为1:2.1×105,1:2.2×105。Western blot结果显示抗knobmAb具有良好的特异性。结论:成功地制备了knob蛋白及其mAb。
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关 键 词: | knob蛋白 原核表达 单克隆抗体 |
文章编号: | 1007-8738(2007)11-1038-03 |
修稿时间: | 2007-08-13 |
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