| 牛蛙核糖核酸酶的表达和鉴定及功能检测 |
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| 引用本文： | 张桂红,付勇,刘彦仿,杨守京,赵君.牛蛙核糖核酸酶的表达和鉴定及功能检测[J].中华肿瘤防治杂志,2005,12(23):1761-1763. |
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| 作者姓名： | 张桂红 付勇 刘彦仿 杨守京 赵君 |
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| 作者单位： | 第四军医大学病理学教研室,陕西,西安,710032;第四军医大学病理学教研室,陕西,西安,710032;第四军医大学病理学教研室,陕西,西安,710032;第四军医大学病理学教研室,陕西,西安,710032;第四军医大学病理学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30370810) |
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| 摘 要： | 目的:在大肠埃希菌中高效表达牛蛙核糖核酸酶(ranacatesbeianaribonuclease,RCRNase),并对其纯化产物进行噻唑蓝(tetrazoliumblue,MTT)实验,观察对肝癌细胞的抑制效果。方法:用异丙基硫代D半乳糖苷(isopropylthioDgalactoride,IPTG)诱导原核表达质粒PET32aRCRNase在大肠埃希菌E.coliBl21(DE3)plysS中表达。菌体经超声、离心后,用NiNTAAgarose亲和层析法对包涵体进行纯化。采用MTT法检测纯化的目的蛋白对体外培养的肝癌细胞的杀伤活性。结果:纯化的目的蛋白经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecylsulphatepolyacrylamidegeleletrophoresis,SDSPAGE)蛋白电泳表明,RCRNase在大肠埃希菌中是以包涵体的形式表达。用MTT法的结果中可以看出,纯化的目的蛋白对体外培养的肝癌细胞具有一定的抑制效果,其IC50值(半抑制浓度)是22.44μg/mL。结论:牛蛙核糖核酸酶在大肠埃希菌中得到大量表达,为进一步研究其生物学特性以及功能打下了良好的基础。
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| 关 键 词： | 癌 肝细胞 核糖核酸酶 大肠埃希菌 比色法 |
| 文章编号： | 1009-4571(2005)23-1761-03 |
| 修稿时间： | 2005年8月25日 |
Expression,indentification and functional characterization of RC-RNase |
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| ZHANG Gui-hong,FU Yong,LIU Yan-fang,YANG Shou-jing,ZHAO Jun.Expression,indentification and functional characterization of RC-RNase[J].Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment,2005,12(23):1761-1763. |
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| Authors: | ZHANG Gui-hong FU Yong LIU Yan-fang YANG Shou-jing ZHAO Jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | carcinoma hepatocellular ribonuclease E coli colorimetry |
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