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气血并治方有效组分干预H/R损伤心肌细胞AMPK相关糖脂代谢通路的分析
引用本文:于永慧,张佩,刘剑刚,李澎,张大武,王承龙.气血并治方有效组分干预H/R损伤心肌细胞AMPK相关糖脂代谢通路的分析[J].中国实验方剂学杂志,2018,24(6):89-95.
作者姓名:于永慧  张佩  刘剑刚  李澎  张大武  王承龙
作者单位:中国中医科学院 西苑医院 心血管病中心, 北京 100091,中国中医科学院 西苑医院 心血管病中心, 北京 100091,中国中医科学院 西苑医院 心血管病中心, 北京 100091,中国中医科学院 西苑医院 基础医学研究所, 北京 100091,中国中医科学院 西苑医院 心血管病中心, 北京 100091,中国中医科学院 西苑医院 心血管病中心, 北京 100091
基金项目:国家自然科学基金面上项目(81273934)
摘    要:目的:观察气血并治方有效组分对缺氧/复氧(H/R)损伤心肌细胞一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)相关糖脂代谢通路的作用机制。方法:分离、提取、培养出生1~2 d SD乳鼠原代心肌细胞,于常规倒置相差显微镜下观察原代心肌细胞形态及生长状态,经α-横纹肌辅肌动蛋白(α-actinin)免疫荧光染色鉴定为心肌细胞后,进行缺氧3 h复氧2 h处理制作H/R损伤模型,随机分为正常组(正常氧),模型组(缺氧/复氧),曲美他嗪组(缺氧/复氧+100μmol·L-1盐酸曲美他嗪,TMZ),气血并治方有效组分组(缺氧/复氧+1 mmol·L-1气血并治方有效组分,CWQB)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测定AMPK代表性亚基心肌一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα),及其糖代谢通路中葡萄糖转运体4(GLUT4),磷酸果糖激酶2(PFK2),脂肪酸代谢通路中乙酰辅酶A羧化酶(ACC2),脂肪酸移位酶(FAT/CD36)的基因及蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组,TMZ组,CWQB组的AMPKα,GLUT4,PFK2基因和蛋白表达上调,ACC2,FAT/CD36基因和蛋白表达下调(P0.05);与模型组比较,TMZ组,CWQB组AMPKα,GLUT4,PFK2,ACC2,FAT/CD36基因和蛋白表达均上调(P0.05),其中TMZ组上调AMPKα,FAT/CD36基因和蛋白,上调GLUT4,PFK2基因表达的效果更为显著(P0.05)。结论:气血并治方有效组分可以激活H/R损伤心肌细胞的AMPK信号通路,增强GLUT4介导的葡萄糖转送,PFK2参与的糖酵解,同时促进FAT/CD36调控的脂肪酸转运,上调ACC2抑制脂肪酸氧化过程,进而提高缺氧/复氧条件下心肌细胞对葡萄糖、脂肪酸等产能底物的利用能力,改善H/R损伤心肌细胞的能量代谢。

关 键 词:气血并治方  缺氧/复氧  心肌细胞  糖脂代谢  一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶
收稿时间:2017/9/13 0:00:00

AMPK Related Glucose Metabolism and Fatty Acid Oxidation Pathways in Hypoxia/Reoxygenation Myocardial Cells: Intervened by Qixue Bingzhi Recipe
YU Yong-hui,ZHANG Pei,LIU Jian-gang,LI Peng,ZHANG Da-wu and WANG Cheng-long.AMPK Related Glucose Metabolism and Fatty Acid Oxidation Pathways in Hypoxia/Reoxygenation Myocardial Cells: Intervened by Qixue Bingzhi Recipe[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2018,24(6):89-95.
Authors:YU Yong-hui  ZHANG Pei  LIU Jian-gang  LI Peng  ZHANG Da-wu and WANG Cheng-long
Institution:Center for Cardiovascular Diseases, Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100091, China,Center for Cardiovascular Diseases, Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100091, China,Center for Cardiovascular Diseases, Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100091, China,Institute of Basic Medical Sciences, Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Science, Beijing 100091, China,Center for Cardiovascular Diseases, Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100091, China and Center for Cardiovascular Diseases, Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100091, China
Abstract:
Keywords:Qixue Bingzhi recipe (CWQB)  hypoxia/reoxygenation (H/R)  cardiomyocytes  glucose metabolism and fatty acid oxidation  adenosine monophosphate activated protein kinase (AMPK)
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