| 聚合酶链式反应及限制性片段长度多态性技术检测乙型肝炎病毒P基因区YMDD基因序列变异 |
| |
| 引用本文： | 周智勇,孙剑,陈金军,侯金林,骆抗先.聚合酶链式反应及限制性片段长度多态性技术检测乙型肝炎病毒P基因区YMDD基因序列变异[J].南方医科大学学报,2001,21(12):885-887. |
| |
| 作者姓名： | 周智勇 孙剑 陈金军 侯金林 骆抗先 |
| |
| 作者单位： | 第一军医大学南方医院感染内科,广东,广州,510515 |
| |
| 基金项目： | 国家973计划(G1999054105)，国家自然科学基金(30070695)，国家自然科学基金重点课题(39630280)，军队科研基金重点课题(96Z024) |
| |
| 摘 要： | 目的建立检测基因变异的聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性(Restrictionfragmentlengthpolymophism,RFLP)法。方法从服用拉米夫定1年以上的慢性乙肝病例中选取10例抽取血清,分别采用错配套式PCR-RFLP技术、PCR产物直接测序和重组克隆测序,检测P基因YMDD变异。结果在10个病例中,PCR-RFLP检测到7例为野毒株、1例为混合株感染、2例为变异株;PCR产物直接测序,9例为野株、1例为变异株;对2份用PCR-RFLP法检测为非野株,而PCR测序为阴性的标本采用克隆后测序,发现均为混合株感染。结论通过对几种检测方法的对比,认为克隆后测序的结果最精确;而从实用性和经济角度来看,采用PCR-RFLP进行初步筛检的方法具有更大的意义,值得推广。
|
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 拉米夫定 耐药 限制性片段长度多态型 |
| 文章编号： | 1000-2588(2001)12-0885-03 |
| 修稿时间： | 2001年3月6日 |
Detection of the YMDD motif mutation of P gene of hepatitis B virus using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism |
| |
| ZHOUZhi-yong,SUNJian,CHENJin-jun,HOUJin-lin,LUOKang-xian.Detection of the YMDD motif mutation of P gene of hepatitis B virus using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism[J].Journal of Southern Medical University,2001,21(12):885-887. |
| |
| Authors: | ZHOUZhi-yong SUNJian CHENJin-jun HOUJin-lin LUOKang-xian |
| |
| Abstract: | Objective To establisha convenientapproachto implementpolymerasechainreaction-restrictionfragmentlength polymorphism(PCR-RFLP)fordetectingof genemutation.Methods Serumsampleswerecollectedfrom10patientswith chronichepatitisB who hadreceivedorallamivudineforat least1year,and3methodsincludingmismatchedPCR-RFLP,directsequenceanalysisof thePCRproduct andcloningpriorto secondarysequenceanalysiswereemployedrespectivelyto examinetheYMDDmotifmutationof P geneof hepatitisB virus(HBV).Results PCR-RFLPrevealedwild-typeHBV infectionin7cases, mixedinfectionin1caseandHBVmutantinfectionin2cases.Withdirectsequenceanalysisof thePCR product,9caseswerefoundwithwild-typeHBVinfection and1withHBVmutantinfection.However,2non-wild-type HBV-infectedcasesas approvedby PCR-RFLP,oppositeto theresultsby directsequenceanalysis,werebothshownby sequenceanalysisaftercloningto suffermixedinfection.Conclusion Sequenceanalysisfollowingcloningisthebestwayto detectYMDDmotifmutationin HBV,butin termsof economyandpracticability,mismatchedPCR-RFLPis of greater significanceinmassscreeningof YMDDmotifmutantHBVthantheother2approaches. |
| |
| Keywords: | hepatitisB virus lamivudine drugresistance polymerasechainreaction restrictionfragmentlengthpolymorphism |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
