| 改良三维条件下人胚胎干细胞向内皮细胞的分化及功能 |
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| 引用本文： | 苏位君,王宝玉,宋祥和,王丽娜,刘艳华,周曼倩,童玲玲,李宗金.改良三维条件下人胚胎干细胞向内皮细胞的分化及功能[J].中国医学科学院学报,2012,34(6):539-544. |
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| 作者姓名： | 苏位君 王宝玉 宋祥和 王丽娜 刘艳华 周曼倩 童玲玲 李宗金 |
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| 作者单位： | 苏位君 (南开大学医学院病理学系,天津,300071) ； 王宝玉 (南开大学人民医院内分泌科,天津,300121) ； 宋祥和 (山东省日照市中医院心内科,山东日照,276800) ； 王丽娜 (南开大学医学院免疫学系,天津,300071) ； 刘艳华 (南开大学医学院免疫学系,天津,300071) ； 周曼倩 (南开大学医学院免疫学系,天津,300071) ； 童玲玲 (南开大学医学院病理生理学系,天津,300071) ； 李宗金 (南开大学医学院病理生理学系,天津,300071) ； |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,天津应用基础与前沿技术研究计划重点项目 |
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| 摘 要： | 目的建立一种改良的三维分化无血清方法,对人胚胎干细胞(hESCs)向内皮细胞进行分化,并对这种方法得到的人胚胎干细胞来源内皮细胞(hESC-ECs)进行功能检测。方法在低附着培养皿中培养未分化的H9 hESCs12 d,使其形成类胚体(EBs),12 d后将已形成的EBs收集起来,用浓度为1.5 mg/ml的Ⅰ型鼠尾胶原重悬,加入六孔板中,在37℃待胶原凝固后加入EGM-2培养基培养3 d,获得出芽类胚体后用0.25%胶原酶Ⅰ和0.56 U/ml LiberaseBlendzyme消化芽生类胚体各20 min,采用流式技术分选出其中CD31阳性的细胞,并用乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL)摄取实验和成管实验验证这部分细胞的内皮细胞功能。结果建立了一种基于胶原培养环境的三维分化方法,采用这种方法能够将hESCs向内皮细胞分化的效率提高到18%,最终获得的hESC-ECs具有和人脐带静脉内皮细胞(HU-VECs)相似的细胞表面标志物,并在乙酰化LDL吞噬实验和血管新生实验中表现出良好的内皮细胞功能。结论建立的改良三维分化方法能够明显提高hESCs向内皮细胞的分化效率,是一种简单高效的分化方法,同时无血清培养方法为将来hESC-ECs的临床应用提供了可能。
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| 关 键 词： | 人胚胎干细胞 人胚胎干细胞来源内皮细胞 三维分化法 CD31 |
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