| 肠道病毒71型微复制子的构建 |
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| 引用本文： | 马英伟,孙乐乐,李静,乔乔,庄志超,赵丽,于学杰,王志玉,温红玲,孙妍琳.肠道病毒71型微复制子的构建[J].山东大学学报(医学版),2015,53(9):35-40. |
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| 作者姓名： | 马英伟 孙乐乐 李静 乔乔 庄志超 赵丽 于学杰 王志玉 温红玲 孙妍琳 |
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| 作者单位： | 山东大学公共卫生学院病毒学实验室, 山东 济南 250012 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81371833);山东省医药卫生科技发展计划(2013WS0211) |
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| 摘 要： | 目的 构建EV71非结构蛋白及EV71 3C蛋白酶微复制子体系,研究微复制子的复制及表达情况。方法 聚合酶链式反应扩增绿色荧光蛋白(EGFP),利用特定酶切位点及连接酶,将目的基因片段连接至pMD19-T载体,分别构建EV71非结构蛋白及EV71 3C蛋白酶微复制子体系。荧光显微镜下观察微复制子表达情况,实时荧光定量PCR观察微复制子复制情况。结果 EV71非结构蛋白微复制子及EV71 3C蛋白酶微复制子表达后,均可观察到特异性绿色荧光,荧光强度有明显差异;转染后12~72 h取样所测RNA含量几乎不变。结论 非结构蛋白全长及3C蛋白酶启动微复制子转录强度不同,所构建微复制子不具备复制功能,提示结构蛋白编码区对病毒RNA复制有重要意义。
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| 关 键 词： | 微复制子 肠道病毒71型 非结构蛋白 报告基因 |
| 收稿时间： | 2015-01-27 |
Construction of the minireplicon of enterovirus 71 |
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| MA Yingwei,SUN Lele,LI Jing,QIAO Qiao,ZHUANG Zhichao,ZHAO Li,YU Xuejie,WANG Zhiyu,WEN Hongling,SUN Yanlin.Construction of the minireplicon of enterovirus 71[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2015,53(9):35-40. |
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| Authors: | MA Yingwei SUN Lele LI Jing QIAO Qiao ZHUANG Zhichao ZHAO Li YU Xuejie WANG Zhiyu WEN Hongling SUN Yanlin |
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| Institution: | Department of Virology, School of Public Health, Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Minireplicon Non-structural protein Enterovirus 71 Reporter gene |
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