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hTERT核心启动子调控的hNIS重组腺病毒的构建与鉴定
引用本文:张俊,王爱东,申咏梅,石怡珍,崔学军,刘增礼,欧阳松应.hTERT核心启动子调控的hNIS重组腺病毒的构建与鉴定[J].中国免疫学杂志,2008,24(6):549-553.
作者姓名:张俊  王爱东  申咏梅  石怡珍  崔学军  刘增礼  欧阳松应
作者单位:1. 江苏省泰州市人民医院核医学科
2. 苏州大学附属第二医院核医学科,苏州,215004
3. 中国科学院生物物理研究所,北京,100101
摘    要:目的:构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠碘转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并初步鉴定。方法:将hTERT核心启动子从hTERT/pcDNA3.1(+)质粒中切出,亚克隆至含全长hNIS cDNA序列的质粒载体FL*-hNIS/pcDNA3,应用限制性内切酶将hTERT-hNIS片段切出后连入穿梭质粒载体pAdTrack,应用AdEasy系统构建出重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS。同时,构建CMV启动子调控的hNIS重组腺病毒Ad-CMV-hNIS作为阳性对照。应用RT-PCR方法验证hTERT在转染肿瘤细胞中的转录活性。结果:成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS并经PCR验证正确。RT-PCR证实hNIScDNA能从Ad-hTERT-hNIS转染的细胞中扩增出来。结论:成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS;hTERT核心启动子在转染的肺癌A549细胞中具有转录活性。为下一步的碘治疗实验提供了实验依据。

关 键 词:钠碘转运体(hNIS)  端粒酶逆转录酶(hTERT)  重组腺病毒  核心启动子
文章编号:1000-484X(2008)06-0549-05
修稿时间:2007年7月20日

Construction and verification of adenovirus containing the hNIS gene under the control of the hTERT core promoter
ZHANG Jun,WANG Ai-Dong,SHEN Yong-Mei,SHI Yi-Zhen,CUI Xue-Jun,LIU Zeng-Li,OUYANG Song-Ying.Construction and verification of adenovirus containing the hNIS gene under the control of the hTERT core promoter[J].Chinese Journal of Immunology,2008,24(6):549-553.
Authors:ZHANG Jun  WANG Ai-Dong  SHEN Yong-Mei  SHI Yi-Zhen  CUI Xue-Jun  LIU Zeng-Li  OUYANG Song-Ying
Abstract:
Keywords:
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