| 重组腺相关病毒转导外源基因入EB病毒转化的B淋巴细胞获长期表达 |
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| 引用本文： | 史耕先,刘音,李琳,朱立平.重组腺相关病毒转导外源基因入EB病毒转化的B淋巴细胞获长期表达[J].中华微生物学和免疫学杂志,2001,21(6):594-599. |
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| 作者姓名： | 史耕先 刘音 李琳 朱立平 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学教研室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39630300);中国医学科学院创新项目资助 |
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| 摘 要： | 目的 采用重组腺相关病毒（AAV）载体pAGX( )，把6A8α-甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞，以获得正义或反义6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法 构建含正义或反义6A8DNA片段的重组pAGX( )质粒，经包装后转导淋巴细胞，经G418筛选，用有限稀释法克隆转导成功的淋巴细胞。Northern杂交和RT-PCR检测转导基因的mRNA表达水平。ConA结合试验检测细胞在转导基因后6A8α-甘露糖苷酶活性的改变，结果 pAGX-反义6A8DNA及pAGX-正义6A8DNA经包装获得了高复制滴度的重组AAV（rAAV)颗粒，藉助rAAV成功地把6A8基因转导入EB病毒转化的B细胞株SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB。Northern杂交结果显示，转导的正义或反义6A8DNA获得表达，经1年余传代培养，RT-PCR检测见BJAB和SKW6细胞中转导的正义或反义6A8DNA的mRNA表达增加，新霉素抗性基因（neo^R)也获得表达，表明转导基因获得了长期表达，ConA结合强度在转导反义6A8DNA的细胞升高，提示转导反义6A8DNA可影响6A8α-甘露糖苷酶的表达。结论 用AAV载体成功地把6A8α-甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB，转导的基因获得长期表达，并干扰6A8α-甘露糖苷酶的表达。
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| 关 键 词： | 重组腺相关病病毒 EB病毒转化 B淋巴细胞 外源基因 转导 |
| 修稿时间： | 2000年6月1日 |
Long-term expression of the exogenous gene in EB virus transformed B lymphocytes transduced by recombinant adeno-associated virus |
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| SHI Gengxian,LIU Yin,LI Lin,et al..Long-term expression of the exogenous gene in EB virus transformed B lymphocytes transduced by recombinant adeno-associated virus[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2001,21(6):594-599. |
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| Authors: | SHI Gengxian LIU Yin LI Lin |
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| Institution: | SHI Gengxian,LIU Yin,LI Lin,et al. Department of Immunology,Institute of Basic Medical Sciences,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100005,P. R. China [ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Adeno associated virus vector Sense and antisense 6A8 DNA Transduction EB virus transformed B cell |
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