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结核分枝杆菌毒素蛋白 higB 的原核表达及分析
引用本文:刘丹,伊正君,付玉荣,李书轻,杨珊珊.结核分枝杆菌毒素蛋白 higB 的原核表达及分析[J].潍坊医学院学报,2015(4).
作者姓名:刘丹  伊正君  付玉荣  李书轻  杨珊珊
作者单位:1. 潍坊医学院临床检验诊断学教研室,山东潍坊,261053
2. 潍坊医学院附属医院检验科
3. 潍坊医学院病原生物学教研室
4. 菏泽市第三人民医院检验科
5. 中国人民解放军第401医院检验科
基金项目:国家自然科学基金联合资助
摘    要:目的:克隆编码结核分枝杆菌毒素基因higB并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增higB基因;构建重组表达质粒pET-32a(+)-higB;筛选出阳性重组质粒后转化大肠杆菌,诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果成功扩增出了higB基因,克隆于载体pET-32 a(+)质粒中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确;转化大肠杆菌BL21后higB蛋白没有发生表达。结论已成功构建结核分枝杆菌毒素基因higB的原核表达载体,但大肠杆菌BL21不能表达出higB蛋白。

关 键 词:结核分枝杆菌  毒素抗毒素系统  higB  蛋白表达

Prokaryotic Expression and Analysis of Toxin higB of Mycobacterium Tuberculosis
LIU Dan,YI Zheng-jun,FU Yu-rong,LI Shu-qing,YANG Shan-shan.Prokaryotic Expression and Analysis of Toxin higB of Mycobacterium Tuberculosis[J].Journal of Weifang Medical College,2015(4).
Authors:LIU Dan  YI Zheng-jun  FU Yu-rong  LI Shu-qing  YANG Shan-shan
Abstract:
Keywords:Mycobaeterium tuberculosis  toxin-antitoxin system  higB  Protein expression
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