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纳米磁流体-单纯疱疹病毒胸苷激酶重组质粒的构建及其对胃癌细胞增殖的影响
引用本文:阿不都外力·吾守尔,李玲,张邦昌.纳米磁流体-单纯疱疹病毒胸苷激酶重组质粒的构建及其对胃癌细胞增殖的影响[J].中华胃肠外科杂志,2012,15(7).
作者姓名:阿不都外力·吾守尔  李玲  张邦昌
作者单位:1. 新疆医科大学第一附属医院胃肠肿瘤外科
2. 中南大学湘雅二医院普通外科,长沙,410011
摘    要:目的 研究hTERT启动子调控下单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)重组质粒的构建、在人胃癌细胞BGC823中的表达及对胃癌细胞BGC823增殖的影响.方法 构建重组质粒pGL3 -hTERT-tk和相应的荧光报告质粒pGL3-hTERT-tk-Luc+;经纳米磁流体PEG-PEI/Fe3O4转染胃癌细胞BGC823,荧光显微镜观察细胞形态变化和转染效率,免疫组织化学(免疫组化)方法检测目的基因在胃癌细胞BGC823中的表达,MTT法检测胃癌细胞BGC823的增殖能力,以上实验均以正常肝细胞LO2为对照.结果 重组质粒pGL3-hTERT-tk构建成功,其长度为1100 bp.荧光素酶标记的阳性、阴性对照及治疗报告质粒pGL3-hTERT-TK- Luc+均能有效转染高表达端粒酶活性的胃癌细胞BGC823,转染效率为(28.1±2.3)%.免疫组化结果显示,重组质粒组胃癌细胞BGC823的细胞质中可见大量HSV -tk基因编码的表达.MTT检测结果示,转染pGL3-hTERT-tk质粒4d后,BGC823细胞增殖受抑制,其A570值为0.254±0.011,低于L02细胞的0.322±0.013;亦低于pGL3-basic-tk转染的BGC823细胞(0.357±0.014)(均P<0.05).结论 纳米磁流体能将重组质粒pGL3-hTERT-tk转染BGC823细胞并获得表达,PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-tk可显著抑制BGC823细胞增殖,有望成为胃癌基因治疗的新型生物制剂之一.

关 键 词:纳米磁流体  HTERT增强子  胸苷激酶基因  胃肿瘤  基因治疗

Construction of pGL3-hTERT-tk recombinant plasmid and effect of PEG-PEI/Fe3O4 Nanomagnetic fluid-tk/GCV on proliferation of gastric cancer cells BGC823 in vitro
BUDUWAILI Wu-shouer , LI ling , ZHANG Bang-chang.Construction of pGL3-hTERT-tk recombinant plasmid and effect of PEG-PEI/Fe3O4 Nanomagnetic fluid-tk/GCV on proliferation of gastric cancer cells BGC823 in vitro[J].Chinese Journal of Gastrointestinal Surgery,2012,15(7).
Authors:BUDUWAILI Wu-shouer  LI ling  ZHANG Bang-chang
Abstract:
Keywords:Nano-magnetic fluids  hTERT enhancer  tk gene  Gastric cancer  BGC823 cells
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