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诱导小鼠破骨前体细胞成熟分化的实验条件探讨
引用本文:王信,汪洋,朱勇军,翁玄,周园东,李平,姜蓉,张健. 诱导小鼠破骨前体细胞成熟分化的实验条件探讨[J]. 中国骨质疏松杂志, 2011, 17(3): 190-194. DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2011.03.002
作者姓名:王信  汪洋  朱勇军  翁玄  周园东  李平  姜蓉  张健
作者单位:重庆医科大学第一附属医院骨科,重庆,400042
摘    要:目的探讨小鼠单核细胞RAW264.7能否在RANKL诱导下向破骨细胞成熟分化。方法 RANKL作用RAW264.7细胞7天~9天,光镜、透射电镜、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)分别观察其细胞形态学变化,用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色法观察TRAP阳性的多核细胞,RT-PCR检测破骨细胞表型和功能基因表达变化情况,扫描电镜观察破骨细胞在骨片上形成骨吸收陷窝。结果光镜、透射电镜下可见细胞胞体增大,为椭圆形或不规则形,胞核5~10个,扫描电镜下可见细胞表面大量的伪足样突起;此外,RANKL能诱导RAW264.7细胞分化为TRAP染色阳性的多核破骨细胞,细胞多为超过5个核的多核巨细胞;RAW264.7细胞成熟分化后具有骨吸收功能,并且能上调Cathepsin-K、TRAP、RANK等典型破骨细胞表型和功能基因mRNA的表达。结论 RAW264.7细胞是一种较好的破骨前体细胞模型,单用50ng/ml的RANKL体外连续诱导7天以上,能明显促进它向成熟的破骨细胞分化。

关 键 词:破骨细胞  RAW264.7细胞  RANKL

Study on experimental conditions of mouse osteoclast precursor cell differentiation
WANG Xin,WANG Yang,ZHU Yongjun,et a.. Study on experimental conditions of mouse osteoclast precursor cell differentiation[J]. Chinese Journal of Osteoporosis, 2011, 17(3): 190-194. DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2011.03.002
Authors:WANG Xin  WANG Yang  ZHU Yongjun  et a.
Affiliation:WANG Xin,WANG Yang,ZHU Yongjun,et al.Department of Orthopedic Surgery,the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing 400042,China
Abstract:
Keywords:RANKL
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