| 乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白1的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 李越,王琦,成军,林原,洪源.乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白1的克隆及原核表达[J].解放军医学杂志,2007,32(11):1154-1156. |
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| 作者姓名： | 李越 王琦 成军 林原 洪源 |
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| 作者单位： | 北京地坛医院传染病研究所,北京,100011;大连医科大学药理学教研室 |
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| 摘 要： | 目的 对应用酵母双杂交技术及生物信息学技术筛选得到的乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白1(HBEBP1)进行克隆,并诱导其在大肠埃希菌BL21中的表达.方法 应用反转录PCR(RT-PCR)技术,以HepG2细胞mRNA为模板,扩增获得HBEBP1基因片段,连接到pGEM-T载体,双酶切鉴定及测序正确后克隆至原核表达载体pET-32a( )中,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达以获得HBEBP1融合蛋白,并通过SDS-PAGE及Western blot证实融合蛋白的特异性.结果 RT-PCR扩增获得大小为372bp的HBEBP1基因片段,插入至原核表达载体pET-32a( )中,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导后,成功获得大小约为33kD的重组蛋白,Western blot证实其具有良好的特异性.结论 构建了pET-32a( )-HBEBP1原核表达载体,并在大肠埃希菌BL21中诱导表达了HBEBP1融合蛋白,为研究HBEBP1蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了基础.
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| 关 键 词： | 肝炎e抗原 乙型 结合蛋白 原核细胞 |
| 收稿时间： | 2007-07-16 |
| 修稿时间： | 2007-08-14 |
Cloning and prokaryotic expression of a novel binding protein 1 of HBeAg |
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| Li Yue, Wang Qi, Cheng Jun,et al..Cloning and prokaryotic expression of a novel binding protein 1 of HBeAg[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2007,32(11):1154-1156. |
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| Authors: | Li Yue Wang Qi Cheng Jun |
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| Institution: | Li Yue, Wang Qi, Cheng Jun, et al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis B e antigen binding protein prokaryotic cells |
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