TTV蛋白抗原在大肠杆菌中的表达 |
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引用本文: | 刘利民,邢培清,李建斌,胡军,陈宗德,周育森,王海涛. TTV蛋白抗原在大肠杆菌中的表达[J]. 郑州大学学报(医学版), 2001, 36(6): 703-704 |
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作者姓名: | 刘利民 邢培清 李建斌 胡军 陈宗德 周育森 王海涛 |
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作者单位: | 河南省红十字血液中心,河南省红十字血液中心,河南省红十字血液中心,河南医科大学微生物与免疫学教研室,河南医科大学微生物与免疫学教研室,中国军事医学科学院微生物与流行病研究所,中国军事医学科学院微生物与流行病研究所 郑州450053,郑州450053,郑州450053,郑州45005 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 3990 0 133 |
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摘 要: | 目的 :用原核系统表达TTV的重组蛋白抗原 ,建立诊断TTV感染的特异性方法。方法 :采用PCR方法扩增TTVORF2 基因 ,将之插入到测序质粒载体中进行测序 ,验证序列正确后再嵌入到原核表达载体pQE30 ,并转化大肠杆菌M15菌株 ,进行诱导表达。用SDS PAGE分析表达产物。表达产物经Ni NTA柱层析纯化后 ,得到纯度为90 %的ORF蛋白抗原。用TTV感染者的阳性血清对该蛋白进行了Western BlotBlotting分析。结果 :经IPTG诱导后 ,筛选出 2株高表达株。结论 :该蛋白具有良好的抗原活性
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关 键 词: | TTV 重组蛋白抗原 原核表达 大肠肝菌 |
Expression of TTV recombinant protein antigen in E.coli |
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Abstract: | Aim:To explore the expression of TTV recombinant protein antigen in E.coli.Methods:Using PCR to sequence the TTV gene and clone to T vector.The recombinant plasmid was transformed into E.coli strain M15 and induced with IPTG.We purified the specific expressed protein through Ni NTA column,then the purification was analyzed by Western Blotting.Results:The TTV recombinant protein antigen was expressed in E.coli.Conclusion: The recombinan protein antigen can used for diagnosis of TTV infection. |
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Keywords: | TTV recombinant protein antigen expression of protein in E.coli |
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