三七总皂苷对大鼠血管平滑肌细胞增殖及JNK磷酸化的影响

【目的】研究发现，三总皂苷（TPNS）具有抑制和促进细胞增殖的双向调节作用，但是具体的作用机制尚不明确。本研究旨在观察TPNS对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及经由何种信号通路介导。【方法】采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）和蛋白印迹（Western blot）法观察了体外培养的大鼠VSMC在不同浓度及一定浓度不同作用时间TPNS作用下，VSMC增殖活性的变化及c—Jun氨基末端激酶（JNK）磷酸化的变化：并用DAPI染细胞核，观察TPNS作用后核形态的变化。【结果】MTT法观察到：TPNS的浓度为0．5g／L，1．0g/L，1．5g／L时，无论是处于静息状态或50mL／L血清刺激下，VSMC的代谢于活性均增高；TPNS的浓度为3．0g／L时，静息培养的VSMC的代谢活性没有明显的变化，而50mL／L血清刺激的VSMC的代谢活性仍增高；TPNS的浓度为6．0g／L，12．0g／L时，静息培养或50mL／L血清刺激下的VSMC的代谢活性均降低，并随着浓度的增大．代谢活性降低越明显。同时．Western blot结果显示：TPNS能快速的激活JNK1／2，并呈时间和浓度依赖性。当TPNS的浓度为0．5g／L时，即可引起JNK的磷酸化，并随着浓度的增大，磷酸化作用增强：当TPNS的浓度为1．5g／L时．作用5min，JNK呈现最大程度的激活，随后逐渐减弱。DAPI染核观察到，6．0g／L TPNS作用48h后，VSMC出现了核固缩、核碎片等细胞凋亡的特征。【结论】较低浓度的TPNS可促进血管平滑肌细胞的增殖，而较高浓度的TPNS可抑制其增殖，JNK1／2磷酸化可能是引起细胞增殖受到抑制的机制之一。