| 人趋化因子巨噬细胞炎性蛋白3α的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 顾涛,罗福康,沈大斌,龚小云,郑红.人趋化因子巨噬细胞炎性蛋白3α的克隆与原核表达[J].重庆医学,2006,35(4):335-338. |
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| 作者姓名： | 顾涛 罗福康 沈大斌 龚小云 郑红 |
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| 作者单位： | 第三军医大学西南医院综合实验研究中心,重庆400038;第三军医大学西南医院综合实验研究中心,重庆400038;第三军医大学西南医院综合实验研究中心,重庆400038;第三军医大学西南医院综合实验研究中心,重庆400038;第三军医大学西南医院综合实验研究中心,重庆400038 |
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| 摘 要： | 目的 克隆人趋化因子MIP-3alpha基因，表达并初步纯化MIP-3alpha融合蛋白。方法 从人扁桃体中提取总RNA，再进行RT-PCR，扩增MIP-3alpha成熟蛋白基因，并在5’和3’端分别添加NcoI和EcoRI酶切位点，通过与之对应的存在于pET32a（＋）质粒上的酶切位点重组于pET32a（＋）载体上，转化E．coli BL21trxB（DE3），筛选阳性克隆，酶切鉴定，DNA测序检测插入序列的正确性，缺失突变MIP-3 alpha序列前端多余碱基，获得MIP-3 alpha天然蛋白表达载体pET32a（＋）／MIP-3 alpha，SDS-PAGE分析其表达，Western Blot验证融合蛋白。大量表达并初步纯化MIP-3 alpha融合蛋白。结果 成功克隆了MIP-3 alpha基因，表达并初步纯化得到MIP-3 alpha融合蛋白。结论 在大肠杆菌中成功构建的MIP-3 alpha硫氧还蛋白融合表达栽体，以可溶性蛋白的方式表达MIP-3 alpha硫氧还蛋白。
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| 关 键 词： | MIP-3 alpha 融合表达 pET32a(+)质粒 蛋白纯化 |
| 文章编号： | 1671-8348(2006)04-0335-04 |
Gene cloning and expression of human chemokine MIP-3 alpha |
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| GU Tao,LUO Fu-kang,SHEN Da-bin,et al..Gene cloning and expression of human chemokine MIP-3 alpha[J].Chongqing Medical Journal,2006,35(4):335-338. |
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| Authors: | GU Tao LUO Fu-kang SHEN Da-bin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MIP-3 alpha |
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