Construction of an inducible nitric-oxide synthase gene transferring vector mediated by retrovirus |
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作者姓名: | 刘景生 臧梦维 彭学贤 胡萍 |
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作者单位: | 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室,医学分子生物学国家重点实验室,中国科学院微生物研究所 |
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摘 要: | 目的:构建逆转录病毒介导的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转移载体.方法:应用DNA重组和PCR扩增技术.结果:通过二步克隆,从质粒pKSiNOS分离编码巨噬细胞iNOS的全长cDNA,亚克隆于中间载体pSP72,调整插入片段二端酶切位点;进而构建含iNOS基因、巨细胞病毒启动子和neo抗性基因的逆转录病毒载体pLNCXiNOS.限制性酶切分析和PCR鉴定证实,重组体iNOS插入片段的大小和方向正确.结论:获得含iNOS基因逆转录病毒表达载体,为建立iNOS基因修饰的神经细胞模型,研究NO/NOS在阿片耐受依赖中的作用奠定基础.
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关 键 词: | 一氧化氮合酶 互补DNA 基因表达调控 真核细胞 重组DNA 逆转录病毒 遗传载体 限制性酶切图谱 聚合酶链式反应 |
Construction of an inducible nitric-oxide synthase gene transferring vector mediated by retrovirus |
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Abstract: | |
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