| 转录因子E2F-1 siRNA表达质粒的构建及对胃癌MGC803细胞的沉默效应 |
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| 引用本文： | 尹永硕,肖强,谢玉波,李雷,王长青,唐振勇,马玉林,崔建华.转录因子E2F-1 siRNA表达质粒的构建及对胃癌MGC803细胞的沉默效应[J].广西医科大学学报,2008,25(2). |
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| 作者姓名： | 尹永硕 肖强 谢玉波 李雷 王长青 唐振勇 马玉林 崔建华 |
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| 作者单位： | 1. 广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021
2. 广西医科大学第一附属医院,麻醉科,南宁,530021 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金，广西医疗卫生科研项目 |
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| 摘 要： | 目的:通过构建人E2F-1基因的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,探讨其对胃癌MGC803细胞中E2F-1基因表达的影响.方法:将设计合成的具有短发夹结构的人E2F-1基因siRNA寡核苷酸链退火形成双链,连接人经BamH I和Hind Ⅲ双酶切后的pSilencer4.1-CMV neo表达质粒,并做酶切及测序鉴定.用脂质体把重组质粒转染至细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR)及蛋白印迹(western blotting)技术分别检测E2F-I mRNA及蛋白表达.结果:经酶切及测序鉴定,成功构建了E2F-l siRNA表达质粒;它可显著抑制MGC803细胞中E2F-1基因mRNA及蛋白表达,与未转染组及阴性对照组细胞比较,分别降低了86.4%、86.1%和81,5%、79.6%.结论:pSilencer4.1一E2F-l重组质粒能抑制人胃癌MGC803细胞E2F-1基因的表达,为进一步E2F-1基因的功能研究及胃癌治疗研究提供了实验基础.
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| 关 键 词： | RNA干扰 胃癌MGC803细胞 重组表达质粒 |
CONSTRUCTION OF TRANSCRIPTION FACTOR E2F-1 siRNA EXPRESSION VECTOR AND SILENCING POTENCY |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | E2F-1 |
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