| 人类U5·116 ku蛋白基因片段的克隆 |
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| 引用本文： | 洪敬欣,邵洁,史雪彬,姚智,杨洁.人类U5·116 ku蛋白基因片段的克隆[J].天津医药,2007,35(6):401-404. |
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| 作者姓名： | 洪敬欣 邵洁 史雪彬 姚智 杨洁 |
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| 作者单位： | 300070,天津医科大学免疫学教研室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;天津市科委资助项目;教育部跨世纪优秀人才培养计划;教育部高等学校博士学科点专项科研基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建人类U5·116 ku基因全长真核表达质粒。方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,一步法合成单链cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人类U5·116 ku基因两段连续的序列,首先分别克隆至pTZ57R/T载体,两段序列连接成全长后再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1(-)-U5·116 ku重组质粒。结果:RT-PCR法获得U5·116 ku基因两段连续的序列,长度分别为1672bp和1246bp,分别与pTZ57R/T载体连接后,选择合适的酶切位点再连接成全长序列,然后将全长序列和pcDNA3.1(-)真核表达载体进行连接、转化、酶切鉴定及序列分析后,证实pcDNA3.1(-)-U5·116 ku重组质粒构建成功。结论:成功克隆了人类U5·116 ku的编码基因,并构建了其真核表达质粒pcDNA3.1(-)-U5·116 ku。
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| 关 键 词： | HeLa细胞 基因表达 遗传载体 质粒 克隆 分子 逆转录聚合酶链反应 人 U5·116 ku蛋白 |
| 修稿时间： | 2007年1月19日 |
Cloning of Full-length Human U5·116 ku Gene |
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| HONG Jingxin,SHAO Jie,SHI Xuebin,YAO Zhi,YANG Jie.Cloning of Full-length Human U5·116 ku Gene[J].Tianjin Medical Journal,2007,35(6):401-404. |
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| Authors: | HONG Jingxin SHAO Jie SHI Xuebin YAO Zhi YANG Jie |
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| Institution: | Department of lmmunology , Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China Abstract |
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