| 一种基于抗氧化反应元件的抗氧化药物筛选模型的制备 |
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| 引用本文： | 刘 阳,陈剑清,舒特俊,吕正兵,张耀洲. 一种基于抗氧化反应元件的抗氧化药物筛选模型的制备[J]. 中草药, 2013, 44(15): 2112-2117 |
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| 作者姓名： | 刘 阳 陈剑清 舒特俊 吕正兵 张耀洲 |
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| 作者单位： | 1. 浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所,浙江杭州,310018
2. 浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所,浙江杭州310018;天津国际生物医药联合研究院,天津300457 |
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| 基金项目： | 江西省科技支撑计划（2010BSB02602） |
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| 摘 要： | 目的 利用抗氧化反应元件(ARE)调控荧光素酶(Luc)报告基因的表达水平,建立抗氧化药物筛选细胞模型.方法 构建由ARE调控Luc表达的重组质粒载体pARE-Luc-Neo,使用FuGENE@HD转染剂将重组质粒转染人胚肾上皮Hek293细胞,通过G418进行筛选,使用稀释法挑选阳性单克隆细胞,经抗氧化蛋白诱导剂TBHQ诱导,检测细胞中Luc的活性,筛选Luc高活性的单克隆细胞株.利用白藜芦醇和姜黄素评价阳性克隆的筛选效果,观察5个中药单体穿心莲内酯、隐丹参酮、水飞蓟素、苦参碱和虎杖苷在不同浓度(0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L)时对Luc表达水平的影响.结果 通过检测Luc活性,筛选获得Hek293-ARE,该细胞中的Luc的表达水平受ARE调控,且在一定范围内与诱导剂的浓度呈相关性.穿心莲内酯、隐丹参酮与水飞蓟素有较好的诱导效果.结论 建立的抗氧化药物细胞筛选模型可有效地、高通量地用于抗氧化药物的初步筛选.
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| 关 键 词： | 抗氧化药物 药物筛选 抗氧化作用元件 细胞模型 荧光素酶报告基因 |
Establishment of a drug screening model based on anti-oxidative response element |
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| LIU Yang,CHEN Jian-qing,SHU Te-jun,LV Zheng-bing,ZHANG Yao-zhou. Establishment of a drug screening model based on anti-oxidative response element[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2013, 44(15): 2112-2117 |
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| Authors: | LIU Yang CHEN Jian-qing SHU Te-jun LV Zheng-bing ZHANG Yao-zhou |
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| Affiliation: | 1.Institute of Biochemistry, College of Life Science, Zhejiang Sci-Tech University, Hangzhou 310018, China 2.Tianjin International Joint Academy of Biotechnology and Medicine, Tianjin 300457, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | anti-oxidative drug drug screening anti-oxidative response element cell model luciferase reporter gene |
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