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幽门螺杆菌尿素酶B在乳酸乳球菌中表达与优化
引用本文:张小娟, 张荣光, 段广才. 幽门螺杆菌尿素酶B在乳酸乳球菌中表达与优化[J]. 中国公共卫生, 2011, 27(9): 1134-1136. DOI: 10.11847/zgggws2011-27-09-27
作者姓名:张小娟  张荣光  段广才
作者单位:1.河南科技大学医学院病原生物学教研室, 河南洛阳471003;;2.郑州大学河南省分子医学重点学科开放实验室
摘    要:目的探讨幽门螺杆菌尿素酶B(UreB)在食品级乳酸乳球菌NZ3900菌株中的优化表达条件。方法利用基因重组技术构建乳酸乳球菌NZ3900(pNZ8110/ureB);采用L25(56)正交表设计,选定诱导剂浓度、诱导时机、诱导时间3个因素各5个水平;采用乳酸链球菌素诱导表达后,检测不同组合的UreB在乳酸乳球菌中的表达,凝胶扫描后用Genetools分析软件进行目的蛋白占细菌总蛋白比例分析;应用极差分析法比较影响蛋白表达的因素主次关系及目的蛋白优化表达条件;应用正交试验方差分析法进行方差分析。结果乳酸乳球菌重组子NZ3900(pNZ8110/ureB)表达的可溶性UreB蛋白最高可达27.26μg/mL,占上清总蛋白比例最高可达20.19%;3个因素对UreB蛋白表达量的影响大小依次为诱导时间、诱导时机和诱导剂浓度,方差分析结果显示,诱导时间对UreB蛋白表达的影响具有统计学意义(P<0.05)。结论应用正交试验法获得UreB蛋白在乳酸乳球菌中的优化表达条件,为进一步评价免疫预防抗幽门螺杆菌感染的效果奠定基础。

关 键 词:幽门螺杆菌  乳酸菌  乳酸链球菌肽翻译融合表达系统(NICE)  尿素酶B  优化表达
收稿时间:2010-11-23

Optimizing expression of Helicobacter pylori ureB gene in Lactococcus lactis NZ3900
ZHANG Xiao-juan, ZHANG Rong-guang, DUAN Guang-cai. Optimizing expression of Helicobacter pylori ureB gene in Lactococcus lactis NZ3900[J]. Chinese Journal of Public Health, 2011, 27(9): 1134-1136. DOI: 10.11847/zgggws2011-27-09-27
Authors:ZHANG Xiao-juan  ZHANG Rong-guang  DUAN Guang-cai
Affiliation:1.Department of Pathologic Biology, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, China
Abstract:Objective To optimize expression conditions of ureB in Lactococcus lactis(L.lactis) engineering bacteria.Methods NZ3900(pNZ8110/ureB) was constructed using recombinant DNA technology.With L25(56) orthogonal table design,inducer concentration,induction time point,and induction time were selected as the three factors,each one at five levels.After the nisin-induced expression,the quantities of ureB expressed in L.lactis with different combinations were compared to that determined with sodium dodecyl sulfate po...
Keywords:Helicobacter pylori  Lactococcus lactis  NICE  ureB  optimizing expression  
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