| 利用RNA干扰技术下调Lon基因表达的生物学效应研究 |
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| 引用本文： | 薛霞,朱运峰,毛建平.利用RNA干扰技术下调Lon基因表达的生物学效应研究[J].海南医学院学报,2006,12(6):502-506,509. |
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| 作者姓名： | 薛霞 朱运峰 毛建平 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院附属医院肿瘤学研究室,北京,100071
2. 军事医学科学院放射病研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 目的:通过构建Lon基因下调的哺乳动物细胞模型表达,观察Lon基因对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响,以探讨Lon蛋白的功能.方法:设计针对Lon蛋白酶的小干扰RNA(siRNA),构建pSilencer U6 2.1-Lon真核表达载体,用脂质体法转染人乳腺癌细胞MCF7,RT-PCR检测Lon基因下调的水平,通过采用高温、紫外线照射、顺铂处理,观察Lon基因下调后细胞敏感性的变化(MTT法).结果:RT-PCR显示重组质粒pSilencer U6 2.1-Lon转染MCF7细胞,Lon基因明显下调,RT-PCR未见扩增目的带,细胞培养结果显示,细胞增殖能力明显减弱.紫外线照射和顺铂处理后的MTT结果显示,pSilencer U6 2.1-Lon转染的MCF7细胞,增殖能力明显下降,与空载体转染组(pSilencer U6 2.1)和未转染组相比有显著性差异(P＜0.05).加热应激试验显示,37,41,43℃处理后,RNA干扰转染组(pSilencer U6 2.1-Lon)与空载体转染组、未转染组相比有显著性差异(P＜0.05).而在45℃时,RNA干扰转染组、空载体转染组与未转染组之间均无显著性差异(P＞0.05).结论:RNAi能有效下调Lon蛋白的表达.Lon基因的下调可抑制乳腺癌细胞MCF7的增殖能力,诱导细胞凋亡,以及可增加MCF7对紫外线和顺铂处理的敏感性.
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| 关 键 词： | RNA干扰 Lon基因 细胞凋亡 |
| 文章编号： | 1007-1237（2006）06-0502-05 |
| 收稿时间： | 2006-10-11 |
| 修稿时间： | 2006-10-11 |
The function investigation of Lon gene expression by down-regulation in MCF7 |
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| XUE Xia,ZHU Yun-feng,MAO Jian-ping.The function investigation of Lon gene expression by down-regulation in MCF7[J].Journal of Hainan Medical College,2006,12(6):502-506,509. |
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| Authors: | XUE Xia ZHU Yun-feng MAO Jian-ping |
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| Institution: | Laboratory of Tumor Molecular Biology, the Afflicted Hospital of Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071 ,P.R.China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference Lon gene Apoptosis |
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