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重组canstatin蛋白抑制体外视网膜微血管内皮细胞的迁移和增殖
引用本文:张珊珊,王晔,陈鹏,孟丽娜,董晓光. 重组canstatin蛋白抑制体外视网膜微血管内皮细胞的迁移和增殖[J]. 眼科新进展, 2009, 29(10)
作者姓名:张珊珊  王晔  陈鹏  孟丽娜  董晓光
作者单位:山东省眼科研究所,山东省眼科学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地,山东省青岛市,266071
基金项目:科技部973计划前期研究专项基金,山东省自主创新重大科技专项计划项目 
摘    要:目的 观察重组血管能抑素(canstatin)蛋白对体外培养的恒河猴视网膜微血管内皮细胞(RF/6A)迁移、增殖及磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phospho-extracelluar regulated protein kinases,pERK)、磷酸化Akt表达的影响,初步探讨重组canstatin蛋白抑制视网膜新生血管的作用机制.方法 体外培养RF/6A细胞系,在培养基中分别添加重组canstatin蛋白和等量的PBS,采用Transwell小室法检测各组发生迁移的内皮细胞并计数;铺Matri-gel胶,行体外成管实验,观察canstatin蛋白对内皮细胞成管的抑制作用;用MTT法检测重组canstatin蛋白对内皮细胞增殖的影响;Western blotting检测重组canstatin蛋白对血清刺激30 min后RF/6A细胞pERK、磷酸化Akt蛋白表达的影响.结果 加入重组canstatin蛋白后,显著抑制了细胞的迁移,重组canstatin蛋白组迁移的细胞数每视野(7.75±1.50)个显著低于PBS组(25.25±2.36)个(t=12.505,P=0.000);两组内皮细胞成管数分别为重组canstatin组每视野(18.67±7.02)个,也显著低于PBS组每视野(44.67±2.52)个(t=6.036,P=0.004).与PBS组相比,重组canstatin蛋白组的内皮细胞的增殖也受到抑制,后者48 h后平均吸光度A490为0.286 9±0.014 0,低于前者0.3349±0.021 7(t=3.723,P=0.01).同时,重组canstatin蛋白降低了RF/6A细胞中pERK蛋白的表达水平.结论 重组canstatin蛋白能通过下调pERK蛋白的表达抑制RF/6A细胞的迁移和增殖,具有潜在抑制视网膜新生血管形成的作用.

关 键 词:血管能抑素  视网膜微血管内皮细胞  迁移  增殖  细胞外调节蛋白激酶

Inhibition of recombinant canstatin protein on migration and proliferation of retinal microvascular endothelial cells in vitro
ZHANG Shan-Shan,WANG Ye,CHEN Peng,MENG Li-Na,DONG Xiao-Guang. Inhibition of recombinant canstatin protein on migration and proliferation of retinal microvascular endothelial cells in vitro[J]. Recent Advances in Ophthalmology, 2009, 29(10)
Authors:ZHANG Shan-Shan  WANG Ye  CHEN Peng  MENG Li-Na  DONG Xiao-Guang
Abstract:
Keywords:Akt
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