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核因子κB对人单核细胞诱导型一氧化氮合酶表达的调控作用
引用本文:张宁,徐永健,张珍祥.核因子κB对人单核细胞诱导型一氧化氮合酶表达的调控作用[J].第四军医大学学报,2004,25(12):1077-1080.
作者姓名:张宁  徐永健  张珍祥
作者单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,湖北,武汉,430030
基金项目:国家自然科学基金项目 (30 0 70 332 ),教育部‘高等院校骨干教师资助计划’项目 (2 0 0 1GJ X)
摘    要:目的 :探讨人单核细胞诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的表达是否受核因子κB(NF κB)调控 .方法 :人单核细胞分别给予脂多糖 (LPS)、LPS加二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)、空白对照刺激培养 .提取核蛋白进行NF κB的电泳移动迁移率改变试验 (EMSA) ;提取RNA进行iNOS的RT PCR ;提取总蛋白进行iNOS的Westernblotting ;并留细胞爬片进行p6 5亚基的免疫荧光检测和iNOS的免疫酶学检测 .结果 :LPS刺激 1h后 ,单核细胞p6 5核表达阳性率及核蛋白NF κB的DNA结合活性均较空白刺激组明显增加 (P <0 .0 5 ) ,而LPS +PDTC组p6 5核表达阳性率及NF κB的DNA结合活性均较LPS组明显降低 (P <0 .0 5 ) ;LPS刺激 1 0h后 ,单核细胞iNOSmRNA的表达较空白刺激组明显增加 (P <0 .0 5 ) ,而LPS +PDTC组iN OSmRNA表达较LPS组明显降低 (P <0 .0 5 ) ;LPS刺激 2 4h后 ,单核细胞iNOS蛋白表达量 (不论是Westernblot,还是免疫组化结果 )均较未刺激组明显增加 (P <0 .0 5 ) ,而LPS +PDTC组均较LPS组明显降低 (P <0 .0 5 ) ;NF κB核表达阳性率与iNOSmRNA、蛋白表达量成正相关 ;NF κB的DNA结合活性亦与iN OSmRNA和蛋白表达量成正相关 .结论 :NF κB的激动剂能促进人单核细胞iNOS的表达 ,且这种促进作用是首先出现在mRNA水平 ,而NF κB的抑制

关 键 词:核因子kB  诱导型一氧化氮合酶  基因表达
文章编号:1000-2790(2004)12-1077-04
修稿时间:2003年12月30

Nuclear factor kB regulates gene expression of inducible mitricoxide sythase in human monocyte
ZHANG Ning,XU Yong Jian,ZHANG Zhen Xiang.Nuclear factor kB regulates gene expression of inducible mitricoxide sythase in human monocyte[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2004,25(12):1077-1080.
Authors:ZHANG Ning  XU Yong Jian  ZHANG Zhen Xiang
Institution:ZHANG Ning,XU Yong Jian,ZHANG Zhen XiangDepartment of Respiratory Medicine,Affiliated Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science & Technology,Wuhan 430030,China
Abstract:
Keywords:
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