重组人血管内皮抑制素通过改善乏氧增强肺腺癌放射敏感性的体外实验研究

目的 研究重组人血管内皮抑制素(恩度)改善乏氧、增强肺腺癌细胞系A549的放射敏感性效果.方法 ①在常氧和乏氧培养下,以不同浓度的恩度与A549细胞分别处理不同的时间,用MTT法分别选择生长抑制率为20％的药物浓度(IC20)；②将A549细胞分别在常氧和乏氧培养下分为对照组和恩度组,加药培养24h后,分别给予高能X线0、2、4、6、8 Gy剂量照射.集落形成率实验检测各组在不同条件下的细胞存活分数,根据多靶单击模型拟合细胞存活曲线,求出各组的平均致死剂量(D0)、准域剂量(Dq)、外推数N、照射2Gy时的细胞存活率(SF2)、放射增敏比(SER)；③将A549细胞分别在常氧和乏氧培养下,分成对照组、单放组、恩度组和联合组.4组分别处理24h后,通过流式细胞仪对各组凋亡细胞进行定量检测,得出各组的凋亡率.结果 ①恩度可以抑制常氧和乏氧培养下的A549细胞的生长,且呈时间-剂量依赖性,IC20分别是(330.34±4.18) mg/L和(437.23±3.32)mg/L;②在多靶单击模型中,在常氧下对照组和恩度组的D0值分别是1.36、1.30,Dq值分别是1.02、1.02;在乏氧培养下对照组和恩度组的D0值分别是1.70、1.39,Dq值分别是2.45、1.03.常氧和乏氧组恩度的SER分别为1.04和1.22；③在常氧培养下,对照组、单放组、恩度组和联合组的凋亡率分别为(15.91±0.57)％、(42.70±0.37)％、(19.90±0.48)％、(41.52±0.38)％,联合组和单放组比较,差异无统计学意义(F=1.22,P=0.479)；在乏氧培养下4组的凋亡率分别为(16.72±0.67)％、(30.11±0.95)％、(26.71±0.62)％、(36.34±0.71)％,联合组和单放组比较,差异有统计学意义(F=3.34,P=0.036).结论 恩度在常氧培养下没有放射增敏作用,细胞凋亡率没有明显增加；而在乏氧培养下能提高A549的放射敏感性,而且细胞凋亡率明显增加.

Enhancement of recombinant human endostatin on the radio-sensitivity of human pulmonary adenocarcinoma in vitro through improving hypoxia