Tubacin对β细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响

目的：观察去乙酰化酶HDAC6特异性抑制剂Tubacin对MIN6细胞胰岛素分泌的影响，并探讨其可能机制。方法：用RT－PCR检测去乙酰化酶家族成员在MIN6细胞的表达，用免疫荧光技术观察HDAC6在小鼠胰岛和MIN6细胞内的定位；分别在5．6mmol／L和25mmol／L葡萄糖的DMEM中加和不加10μmol／LTubacin，用其处理MIN6细胞24h，收集上清，ELISA检测胰岛素浓度。同时用MTT法检测Tubacin对MIN6细胞活力的影响，RT－PCR检测上述处理条件下Insulin基因的表达情况。以Westernblot和免疫荧光技术检测Tubacin对MIN6细胞骨架蛋白α－tubulin乙酰化水平的影响。结果：MIN6细胞中各乙酰化酶家族成员mRNA的表达水平相差较大，其中HDAC6表达相对较高。HDAC6主要表达于小鼠胰岛B细胞及MIN6细胞胞浆中。在5．6imnol／L和25mmol／L葡萄糖条件下，Tubaein处理24h可以显著抑制胰岛素分泌，但不影响MIN6细胞活力。同时，在5．6mmol／L葡萄糖存在条件下Tubacin不影响胰岛素基因表达，在25mmol／L葡萄糖存在条件下Tubacin可轻度上调胰岛素基因表达。Westernblot和免疫荧光结果发现，Tubacin抑制胰岛素分泌的同时伴有α—tubulin乙酰化水平增加。结论：HDAC6抑制剂Tubacin可能通过增加MIN6细胞d．tubulin乙酰化水平，改变细胞骨架的活动度而抑制胰岛素分泌。