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鼻咽癌细胞株CNE-2Z中肿瘤干细胞样细胞的悬浮培养与鉴定
作者姓名:肖调立  田道法  何迎春  刘湘  范婧莹  YANG PC
作者单位:1.湖南中医药大学中西医结合学院410007;2.湖南省第二人民医院整形美容科;3.McMaster university Canada;
基金项目:国家自然科学基金(No.81072904;No.30973856;No.81273988);中国博士后基金(No.2011M501277);湖南省科技计划项目(No.2010SK3021);湖南省2011年研究生创新基金研究项目(No.CX2011B355);湖南省外国专家局引智项目(湘财社指2011[40]号);湖南省中医药科研项目(2010007;201142);湖南省中医五官科学重点学科;湖南省海外名师计划(湘教通2012-488)
摘    要:目的探讨鼻咽癌细胞株CNE 2Z中肿瘤干细胞样细胞的富集与鉴定方法。方法鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞普通培养至对数生长期,不同密度细胞分别加入无血清培养液中继续培养,制备第9天无血清培养细胞爬片,CD133和CD44克隆抗体免疫组化染色,电镜观察超微结构。结果无血清悬浮培养至第9天时,以1×10~5/m1细胞密度组活细胞比率最高;普通培养细胞爬片的CD133和CD44细胞强阳性率分别是2.71%和3.00%,而无血清培养细胞爬片的CD133和CD44强阳性率分别为66.7%和67.00%(P<0.01),表现正相关(P<0.01);扫描电镜和透射电镜观察显示,阳性细胞表现特殊的超微结构特点。结论无血清悬浮培养法可富集鼻咽癌细胞中的肿瘤干细胞样细胞,CD133和CD44可作为其特异性表面标志物。

关 键 词:鼻咽癌  肿瘤干细胞样细胞  悬浮培养法  细胞鉴定
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