辛伐他汀对高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤的干预作用及其机制研究

目的 （1）观察乳鼠心肌细胞对高浓度葡萄糖刺激的反应,探讨其可能的机制。（2）观察辛伐他汀对高浓度葡萄糖刺激下心肌细胞损伤的干预作用,并探讨其可能机制。方法 （1）取SD乳鼠心肌细胞做原代培养。（2）空白对照组（control组）:不加任何刺激药物,仅用含有20%胎牛血清的DMEM培养基继续培养72小时。（3）高糖刺激组（high glucose,GS组）:含有20%胎牛血清的DMEM培养基中加入终浓度为25 mmol/L的葡萄糖培养72小时。（4）辛伐他汀（simvastatin,Sim）干预组:含有20%胎牛血清的高糖（葡萄糖终浓度为25 mmol/L）DMEM培养基中,加入终浓度分别为10^-7、10^-6、10^-5 mol/L（M）的辛伐他汀培养72小时,分别为GS+10^-7MSim组、GS+10^-6MSim组、GS+10^-5MSim组。（5）甲羟戊酸对照组（GS+MVA组）:含有20%胎牛血清的高糖（葡萄糖终浓度为25 mmol/L）DMEM培养基中,加入终浓度为0.2 mmol/L（mM）甲羟戊酸培养72小时。（6）甲羟戊酸干预组(GS+10^-5MSim+MVA组):含有20%胎牛血清的高糖（葡萄糖浓度为25 mmol/L）DMEM培养基中加入终浓度10^-5M辛伐他汀及0.2 mmol/L甲羟戊酸培养72小时。（7）用MTT比色法测细胞活力,按照各自检测试剂盒说明测定培养基中LDH活力、MDA含量、NO含量、SOD活力、Caspase-3表达、细胞内GSH的含量和ROS浓度,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定细胞内NADPH氧化酶p22phox、p47phox亚基mRNA的表达水平,Western blot测定细胞内p38MAPK蛋白的表达。结果 （1）与空白对照组比较,高糖刺激组细胞活力明显降低（P<0.01）,LDH活力、MDA水平显著增加（P<0.01）,SOD活力、GSH含量显著降低（P<0.01）,ROS产生显著增高（P<0.01）,Caspase-3表达显著升高（P<0.01）,细胞内NADPH氧化酶亚基p22phox、p47phox mRNA表达明显增加（P<0.01）,分别达对照组的2.26?

The effects and mechanisms of simvastatin on high glucose-induced injury in the neonatal rat cardiomyocytes

目的 （1）观察乳鼠心肌细胞对高浓度葡萄糖刺激的反应,探讨其可能的机制。（2）观察辛伐他汀对高浓度葡萄糖刺激下心肌细胞损伤的干预作用,并探讨其可能机制。方法 （1）取SD乳鼠心肌细胞做原代培养。（2）空白对照组（control组）:不加任何刺激药物,仅用含有20%胎牛血清的DMEM培养基继续培养72小时。（3）高糖刺激组（high glucose,GS组）:含有20%胎牛血清的DMEM培养基中加入终浓度为25 mmol/L的葡萄糖培养72小时。（4）辛伐他汀（simvastatin,Sim）干预组:含有20%胎牛血清的高糖（葡萄糖终浓度为25 mmol/L）DMEM培养基中,加入终浓度分别为10^-7、10^-6、10^-5 mol/L（M）的辛伐他汀培养72小时,分别为GS+10^-7MSim组、GS+10^-6MSim组、GS+10^-5MSim组。（5）甲羟戊酸对照组（GS+MVA组）:含有20%胎牛血清的高糖（葡萄糖终浓度为25 mmol/L）DMEM培养基中,加入终浓度为0.2 mmol/L（mM）甲羟戊酸培养72小时。（6）甲羟戊酸干预组(GS+10^-5MSim+MVA组):含有20%胎牛血清的高糖（葡萄糖浓度为25 mmol/L）DMEM培养基中加入终浓度10^-5M辛伐他汀及0.2 mmol/L甲羟戊酸培养72小时。（7）用MTT比色法测细胞活力,按照各自检测试剂盒说明测定培养基中LDH活力、MDA含量、NO含量、SOD活力、Caspase-3表达、细胞内GSH的含量和ROS浓度,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定细胞内NADPH氧化酶p22phox、p47phox亚基mRNA的表达水平,Western blot测定细胞内p38MAPK蛋白的表达。结果 （1）与空白对照组比较,高糖刺激组细胞活力明显降低（P<0.01）,LDH活力、MDA水平显著增加（P<0.01）,SOD活力、GSH含量显著降低（P<0.01）,ROS产生显著增高（P<0.01）,Caspase-3表达显著升高（P<0.01）,细胞内NADPH氧化酶亚基p22phox、p47phox mRNA表达明显增加（P<0.01）,分别达对照组的2.26?