摘 要: | 导言快速DNA顺序法技术的建立使我们能描绘出人类珠蛋白mRNA的顺序。这些方法就是用反转录酶从mRNA合成互补的DNA (cDNA),并测定出它的顺序。在细菌质粒中,克隆这些双链的cDNA,从而可以获得大量纯DNA,这大大简便了顺序的分析。然而这些方法对推导珠蛋白mRNA的5’末端的顺序常常是无效的,因为在制备双链cDNA克隆期间,各种长度不同的5’端顺序就被消化并丢失。人类珠蛋白mRNA的5’端和3’端非翻译区是极为有趣的,虽然不知道它们的确切功能,但在蛋白质合成的过程中,似乎起着必要的作用。在本文中将阐述我们用作分析人类α、β、γ珠蛋白mRNA 5’端非翻译区顺序的方法。我们还利用γ珠蛋白cDNA的质粒获得的一种克隆来测定~Aγ珠蛋白mRNA的3’端非翻译区的全部顺序。
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