| 超声微泡促腺病毒载体转染MDR1基因效率的体外实验研究 |
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| 引用本文： | 王佚,郭振华,金先庆,郭玉霞,罗庆,王志刚.超声微泡促腺病毒载体转染MDR1基因效率的体外实验研究[J].第三军医大学学报,2009,31(1). |
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| 作者姓名： | 王佚 郭振华 金先庆 郭玉霞 罗庆 王志刚 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学,附属儿童医院外科实验室,重庆,400014
2. 重庆医科大学,超声研究所,重庆,400010 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，重庆市教委科学技术研究项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨超声微泡造影剂在体外促进腺病毒载体介导的MDRl基因转染兔骨髓单个核细胞的效率,并初步探讨其安全性.方法 根据是否加入超声微泡造影剂和超声辐照将分选的兔骨髓单个核细胞分为常规培养组(A)、腺病毒MDRl基因转染组(B)、腺病毒MDRl基因转染+超声辐照组(C)、微泡造影剂+腺病毒MDRl基因转染组(D)、微泡造影剂+腺病毒MDRl基因转染+超声辐照组(E).收集各组细胞,应用RT-PCR法、流式细胞技术等分别从基因、功能及细胞生物学特性等方面检测外源性MDR1基因在骨髓单个核细胞内的功能性表达及安全性.结果 收获高滴度的Ad5-MDR1腺病毒载体并成功制备腺病毒微泡造影剂;RT-PCR结果 显示,除A组外其余4组在194 bp处均观察到特异性MDR1电泳条带,证实外源性MDR1基因通过腺病毒载体整合到细胞基因组中,且E组MDR1电泳条带的光密度比值明显高于B、C、D组(P<0.05);柔红霉素排出实验证实外源性MDR1基因表达产物P-gP有药物外排泵功能,且E组P-gp阳性率最高(P<0.05),而柔红霉素阳性率显著降低;一定强度的超声辐照及微泡造影剂对骨髓单个核细胞的细胞周期无明显影响.结论 低频超声波击碎微泡造影剂,能促进以腺病毒为载体介导的外源性MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的效率,且安全可行.
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| 关 键 词： | MDR1基因 超声 微泡造影剂 基因治疗 |
Ultrasonic microbubbles enhance efficiency of adenovirus vector-mediated MDR1 gene transfection in vitro |
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| WANG Yi,GUO Zhen-hua,JIN Xian-qing,GUO Yu-xia,LUO Qing,WANG Zhi-gang.Ultrasonic microbubbles enhance efficiency of adenovirus vector-mediated MDR1 gene transfection in vitro[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2009,31(1). |
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| Authors: | WANG Yi GUO Zhen-hua JIN Xian-qing GUO Yu-xia LUO Qing WANG Zhi-gang |
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| Institution: | WANG Yi1,GUO Zhen-hua1,JIN Xian-qing1,GUO Yu-xia1,LUO Qing1,WANG Zhi-gang2(1Laboratory of Surgery,Children's Hospital,Chongqing Medical University,Chongqing 400014,2Institute of Ultrasonography,Second Affiliated Hospital,Chongqing 400010,China Contribute equally to this work) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | multidrug-resistance gene 1 ultrasound microbubble gene therapy |
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