乙型肝炎病毒X蛋白调控sFRP1和sFRP5启动子区的甲基化修饰及其分子机制的探讨 |
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引用本文: | 卫波,陈斌,成扬.乙型肝炎病毒X蛋白调控sFRP1和sFRP5启动子区的甲基化修饰及其分子机制的探讨[J].中国病原生物学杂志,2014(6):504-508. |
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作者姓名: | 卫波 陈斌 成扬 |
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作者单位: | 上海市浦东新区人民医院感染科;上海市浦东新区人民医院检验科;上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所 |
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摘 要: | 目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白调控sFRP 1、sFRP5启动子区的甲基化修饰分子机制,以期指导乙型肝炎病毒感染所致疾病的临床治疗。方法选取标本株HBV并对其进行培养,提取DNA,纯化后分别进行甲基化特异性PCR和硫化测序PCR,对目的基因进行测序。结果稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞株sFRP1、sFRP5基因的启动子区CpG岛的甲基化程度比HepG2细胞株高,经DAC处理的稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞株的sFRP1、sFRP5启动子区CpG岛甲基化程度有部分回落且呈药物剂量依赖。乙型肝炎病毒X蛋白可对sFRP1、sFRP5基因的启动子区的甲基化起到诱导作用;DAC可逆转HBV X蛋白所诱导的sFRP1启动子区甲基化程度,且呈剂量依赖;进行sFRP1基因扩增时,HBx组的甲基化程度比GFP组高。结论乙型肝炎病毒x蛋白通过诱导相关的甲基化转移酶以及甲基化CpG粘附蛋白而富集于sFRP1基因和sFRP5基因的启动子区,从而促进基因CpG岛的甲基化,并且还可以诱导组蛋白的脱乙酰化,最终导致sFRP1基因和sFRP5基因的表达下调或沉默。
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关 键 词: | 乙型肝炎病毒 甲基化修饰 分子机制 甲基化特异性PCR 硫化PCR测序 |
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