扁桃体间充质干细胞免疫学特性的初步研究

目的 探讨扁桃体间充质干细胞(tonsil mesenchymal stem cells,TMSCs)的免疫学特性及机制.方法 取慢性扁桃体炎患儿的扁桃体组织,分离、培养TMSCs,通过流式细胞术检测HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ、CD80、CD86等免疫分子的表达情况.以牙周膜干细胞作为对照,观察TMSCs能否引起同种异体外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)的增殖,以及TMSCs对混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)和植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)引起的淋巴细胞增殖的影响.建立TMSCs+PHA+异体PBMCs、TMSCs+MLR的培养体系,测定细胞上清液中的犬尿氨酸浓度.在上述反应体系进行中和实验,观察被TMSCs抑制了的淋巴细胞重新发生增殖的情况.每个实验重复3次,每组6个佯本.统计学方法采用方差分析,P ＜0.05为差异有统计学意义.结果 TMSCs表达HLA-Ⅰ,但不表达HLA-Ⅱ和共刺激分子CD80、CD86.TMSCs与异体PBMCs共培养5d后,刺激指数为1.38±0.26,而单纯PBMCs培养5d后的刺激指数为1.22±0.28,2组差异无统计学意义(P＞0.05),证实TMSCs不会引起异体PBMCs增殖.TMSCs与异体PBMCs、PHA共培养5d后,刺激指数分别为1.49±0.29(TMSCs∶ PBMCs为0.5∶1)和1.23±0.22(TMSCs∶ PBMCs为1∶1),而PBMCs+PHA组培养5d后的刺激指数为4.60±0.81,2组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05),说明TMSCs能够抑制PHA引起的淋巴细胞增殖.TMSCs与MLR共培养5d后,刺激指数分别为1.29±0.23(TMSCs∶ PBMCs为0.5∶1)和1.26±0.27(TMSCs∶ PBMCs为1∶1),而MLR培养5d后的刺激指数为3.04±0.66,2组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05),说明TMSCs能够抑制MLR引起的淋巴细胞增殖.在TMSCs+PHA+异体PBMCs、TMSCs+MLR的培养体系中,犬尿氨酸浓度显著升高,分别为(26.0±2.3) μmol/L和(23.5±4.5)μmol/L.中和实验发现,1-甲基-L-色氨酸基本恢复了被TMSCs抑制的淋巴细胞增殖.结论 TMSCs具有低免疫原性和免疫抑制特性,有望进行同种异体移植.

The immunological characteristics of tonsil mesenchymal stem cells