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线粒体加工肽酶干扰RNA真核表达载体转染PC12细胞系的构建及鉴定
引用本文:张艳梅,马飞煜,王芳,王佳烈,李兰根,呼格吉乐.线粒体加工肽酶干扰RNA真核表达载体转染PC12细胞系的构建及鉴定[J].国际神经病学神经外科学杂志,2010,37(2).
作者姓名:张艳梅  马飞煜  王芳  王佳烈  李兰根  呼格吉乐
作者单位:1. 内蒙古自治区医院神经内科,内蒙古呼和浩特市,010010
2. 汕头市中心医院,广东省汕头市,515031
3. 江汉大学医学院,湖北省武汉市,430056
4. 内蒙古医学院生化教研室,内蒙古呼和浩特市,010010
基金项目:国家自然基金,内蒙古自然科学基金 
摘    要:目的利用干扰RNA技术构建线粒体加工肽酶(MPPs)的干扰RNA真核表达载体,稳定转染大鼠PC12细胞来抑制MPPs基因的表达,为研究MPPs蛋白的功能提供实验基础。方法脂质体转染已经构建好的4个MPPs干扰RNA真核表达载体和阴性对照干扰RNA真核表达载体到大鼠PC12细胞株,G418筛选阳性转染细胞克隆,制备稳定转染5个MPPs干扰RNA真核表达载体的PC12细胞系。用RT-PCR检测MPPs基因表达。结果获得稳定转染5个MPPs干扰RNA真核表达载体的PC12细胞系,RT-PCR证实所有4个干扰组(siRNA1,siRNA2,siRNA3 and siRNA4)MPPs-mRNA表达均下调,分别达到28%、38%、26%、16%。结论成功建立稳定转染MPPs干扰RNA的PC12细胞系。通过RT-PCR等相关方法证实MPPs干扰RNA真核表达载体转染PC12细胞成功。

关 键 词:干扰RNA  线粒体加工肽酶  转染  细胞系  大鼠

Establishment and identification of PC12 cell line transfected by eukaryotic expression vectors of RNA interference specific for mitochondrial processing peptidases
Abstract:
Keywords:
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