线粒体加工肽酶干扰RNA真核表达载体转染PC12细胞系的构建及鉴定 |
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引用本文: | 张艳梅,马飞煜,王芳,王佳烈,李兰根,呼格吉乐. 线粒体加工肽酶干扰RNA真核表达载体转染PC12细胞系的构建及鉴定[J]. 国际神经病学神经外科学杂志, 2010, 37(2) |
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作者姓名: | 张艳梅 马飞煜 王芳 王佳烈 李兰根 呼格吉乐 |
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作者单位: | 1. 内蒙古自治区医院神经内科,内蒙古呼和浩特市,010010 2. 汕头市中心医院,广东省汕头市,515031 3. 江汉大学医学院,湖北省武汉市,430056 4. 内蒙古医学院生化教研室,内蒙古呼和浩特市,010010 |
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基金项目: | 国家自然基金,内蒙古自然科学基金 |
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摘 要: | 目的利用干扰RNA技术构建线粒体加工肽酶(MPPs)的干扰RNA真核表达载体,稳定转染大鼠PC12细胞来抑制MPPs基因的表达,为研究MPPs蛋白的功能提供实验基础。方法脂质体转染已经构建好的4个MPPs干扰RNA真核表达载体和阴性对照干扰RNA真核表达载体到大鼠PC12细胞株,G418筛选阳性转染细胞克隆,制备稳定转染5个MPPs干扰RNA真核表达载体的PC12细胞系。用RT-PCR检测MPPs基因表达。结果获得稳定转染5个MPPs干扰RNA真核表达载体的PC12细胞系,RT-PCR证实所有4个干扰组(siRNA1,siRNA2,siRNA3 and siRNA4)MPPs-mRNA表达均下调,分别达到28%、38%、26%、16%。结论成功建立稳定转染MPPs干扰RNA的PC12细胞系。通过RT-PCR等相关方法证实MPPs干扰RNA真核表达载体转染PC12细胞成功。
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关 键 词: | 干扰RNA 线粒体加工肽酶 转染 细胞系 大鼠 |
Establishment and identification of PC12 cell line transfected by eukaryotic expression vectors of RNA interference specific for mitochondrial processing peptidases |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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