| 腺病毒介导CⅡTA突变体基因转移抑制MHCⅡ类分子表达的体外研究 |
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| 引用本文： | 管政,张军,沈茜. 腺病毒介导CⅡTA突变体基因转移抑制MHCⅡ类分子表达的体外研究[J]. 中国免疫学杂志, 2007, 23(10): 872-877 |
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| 作者姓名： | 管政 张军 沈茜 |
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| 作者单位： | 第二军医大学长海医院实验诊断科,上海,200433 |
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| 基金项目： | 上海市科委联合利华基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建携带小鼠MHCⅡ类分子反式激活因子(MHC class Ⅱ molecule transactivator,CⅡTA)突变体基因的腺病毒,并观察腺病毒介导该基因的表达情况以及表达产物的体外功能.方法:采用常规分子生物学方法从IFN-γ诱导后的BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞中获得Ⅳ型CIITAcDNA;利用重叠延伸PCR法构建CIITA突变体基因,并克隆入表达载体pIRES;采用pAdEasy-1系统获得具有感染能力的、携带CIITA突变体基因的缺陷型重组腺病毒(Ad-CIITAm)和空载对照病毒(Ad-GFP),并经大量扩增、纯化及滴度测定;将Ad-CⅡTAm和Ad-GFP分别感染HeLa细胞和Raji细胞,流式细胞术观察对诱导型和组成型HLA-DR分子表达的影响.结果:成功克隆了小鼠CⅡTA突变体基因,并构建了携带小鼠CⅡTA突变体基因的重组腺病毒Ad-CⅡTAm;经流式细胞术证实感染Ad-CⅡTAm的Hela和Raji细胞较感染Ad-GFP的细胞,其表面HLA-DR分子的表达均受到明显的抑制.结论:本实验证实了重组腺病毒介导表达的小鼠CⅡTA突变体在体外能够有效地抑制MHCⅡ类分子的表达.
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| 关 键 词： | CⅡTA 突变体 MHCⅡ类分子 腺病毒 |
| 文章编号： | 1000-484(2007)10-0872-07 |
| 修稿时间： | 2006-02-15 |
In vitro study on inhibition of expression of MHC Ⅱ molecules by adenovirus-mediated gene transfer of CⅡTA mutant gene |
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| GUAN Zheng,ZHANG Jun,SHEN Qian. In vitro study on inhibition of expression of MHC Ⅱ molecules by adenovirus-mediated gene transfer of CⅡTA mutant gene[J]. Chinese Journal of Immunology, 2007, 23(10): 872-877 |
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| Authors: | GUAN Zheng ZHANG Jun SHEN Qian |
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