糖肾平含药血清对高糖诱导肾小管上皮细胞增殖作用及RhoA/ROCK 信号通路影响的研究

目的：探讨糖肾平含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及RhoA/ROCK信号通路的影响。方法：制备鼠含药血清；培养肾小管上皮细胞分为：正常组，高糖组，抑制剂（Y27632）组，厄贝沙坦组，糖肾平低、中、高剂量组，3000细胞/孔种于96孔板，每组8个复孔，12、24、48、60 h观察细胞，MTT法检测细胞增殖。Western blotting检测肾小管上皮细胞中RhoA、ROCK1、α-SMA和E-Cadherin蛋白的表达。结果：高糖诱导后细胞呈梭型或不规则三角形；含药血清干预后，细胞呈扁平不规则多角形。MTT：12 h，与正常组比，各组OD值升高；24、48、60 h，与正常组比，高糖组OD值显著升高（P<0.01）；与高糖组比，各治疗组OD值有不同程度降低（P<0.05），48 h，与Y27632组、厄贝沙坦组和糖肾平高剂量组比，糖肾平低、中剂量组OD值降低（P<0.05）；60 h，与Y27632组比，糖肾平中剂量组降低；与厄贝沙坦组比，糖肾平各剂量组OD值降低（P<0.05）；与糖肾平高剂量组比，糖肾平低剂量组升高（P<0.05）。Western blotting，与正常组比，高糖组E-Cadherin蛋白表达减少，RhoA、ROCK1和α-SMA蛋白表达增加（P<0.01）；与高糖组比，各组E-Cadherin蛋白表达增加，RhoA、ROCK1和α-SMA蛋白表达减少，高剂量组有显著差异（P＜0.01）；与Y27632组比，糖肾平高剂量组ROCK1、E-Cadherin和α-SMA蛋白表达无统计学差异（P＞0.05），RhoA蛋白表达减少（P＜0.01）；与厄贝沙坦组比，糖肾平高剂量组RhoA、ROCK1、E-Cadherin和α-SMA蛋白表达无统计学差异（P＞0.05）。结论：糖肾平通过抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖和RhoA/ROCK信号通路相关分子的表达，从而逆转上皮-间质转分化，抑制肾间质纤维化，延缓糖尿病肾病病情进展。

Effect of Tangshenping Medicated Serum on Proliferationand RhoA / ROCK Signaling Pathway of High Glucose-induced Epithelial Cells of Renal Tubules