| 人分化抑制因子3基因原核表达载体的构建及融合蛋白的表达 |
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| 引用本文： | 贾丽,李晓军.人分化抑制因子3基因原核表达载体的构建及融合蛋白的表达[J].医学研究生学报,2008,21(10). |
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| 作者姓名： | 贾丽 李晓军 |
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| 作者单位： | 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏南京,210002 |
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| 基金项目： | 江苏省六大人才高峰基金 |
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| 摘 要： | 目的:在大肠埃希菌中表达和纯化人分化抑制因子3(Id3),为进一步研究Id3的生物学活性打下基础. 方法:PCR扩增人Id3基因编码区的DNA片段,将PCR产物克隆至pGEM-T Esay载体中并测序鉴定.将Id3 cDNA片段重组入原核表达质粒pET-32a( ),转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白的表达,表达产物经Western blot 鉴定,并通过镍亲和层析柱纯化His-Tag标记的融合蛋白. 结果:成功地构建了Id3的原核表达载体.Western blot分析证实,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了His-Tag融合蛋白,亲和层析法纯化后获相对分子质量为34 000的Id3融合蛋白. 结论:重组质粒pET32a( )-Id3能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,镍亲和层析柱可纯化获得融合蛋白.
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| 关 键 词： | 分化抑制因子3 原核表达 融合蛋白 |
Construction of prokaryotic expression vector of Id3 and expression of fusion protein in E. coli |
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| JIA Li,LI Xiao-jun.Construction of prokaryotic expression vector of Id3 and expression of fusion protein in E. coli[J].Bulletin of Medical Postgraduate,2008,21(10). |
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| Authors: | JIA Li LI Xiao-jun |
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| Institution: | JIA Li,LI Xiao-jun(PLA Institute of Clinical Laboratory Medicine,Nanjing General Hospital of Nanjing Military Comm,,PLA,Nanjing 210002,Jiangsu,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Inhibitor of differentiation 3 Prokaryotic expression Fusion protein |
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