链球菌噬菌体透明质酸裂解酶的异源表达及酶学性质表征

透明质酸酶是一类能降解透明质酸的酶的总称,在生物医药及药物递送等多方面具有重要的应用价值。为了挖掘高活性、高底物特异性及高稳定性的透明质酸酶,对来自链球菌噬菌体的透明质酸裂解酶(HylP)进行了异源表达及酶学性质表征。结果表明HylP由337个氨基酸残基构成,是多糖裂解酶家族16(PL16)新成员,重组HylP可在大肠埃希菌BL21(DE3)中可溶性表达,纯化产率可达到30 mg/L,最适酶活反应条件为40℃、pH 6.0,且在35℃及pH 6.0～7.0的中性条件下较为稳定。HylP专一性作用于透明质酸,比活力为24 u/mg;该酶的米氏常数(K_m)为0.13 mg/mL,催化常数(k_cat)为13.80 s^-1,具有较好的催化活性。链球菌噬菌体来源的HylP具有中温、高特异性、高酶活的特性,在绿色制备功能性低分子透明质酸上有潜在应用价值。