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| 携带SLC基因的Birc5-siRNA质粒载体的构建及鉴定 | |
| 引用本文： | 舒榕,王强,朱慧芬,孙媛丽,贺琪,万京华.携带SLC基因的Birc5-siRNA质粒载体的构建及鉴定[J].华中科技大学学报(医学版),2015(1). |
| 作者姓名： | 舒榕 王强 朱慧芬 孙媛丽 贺琪 万京华 |
| 作者单位： | 1. 湖北省中山医院麻醉科,武汉,430033 2. 武汉科技大学医学院基础医学院病原生物与免疫学系,武汉,430065 3. 华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系,武汉,430030 |
| 基金项目： | 湖北省教育厅科学研究计划重点项目 |
| 摘 要： | 目的：构建携带SLC基因的Birc5‐siRNA质粒载体，为肿瘤靶向治疗研究提供基础。方法使用Ambion公司siRNATarget Finder设计的Birc5 mRNA干扰序列，将Birc5‐siRNA插入载体 PEGFP6‐1后转化大肠埃希菌扩增培养，提取质粒；将SLC插入质粒pGenesil‐8后转化细菌扩增培养，提取质粒；挑取酶切鉴定正确的质粒转化菌液测序鉴定；采用分子克隆技术构建特异性沉默Birc5且携带SLC基因的质粒，命名为pgsiRNA‐Birc5＋SLC。结果质粒Birc5能被 EcoRⅠ酶切出1条约400 bp的DNA条带，说明Birc5‐siRNA 已插入质粒载体PEGFP6‐1；pGenesil‐8‐SLC能被BglⅡ＋ XbaⅠ酶切出1条约430 bp的DNA条带，说明SLC插入正确；酶切鉴定正确的质粒转化菌液Birc5‐siRNA和SLC测序结果显示均为插入正确的克隆质粒；经酶切鉴定分析显示pgsiRNA‐Birc5＋SLC符合酶切鉴定结果，表明携带SLC基因的Birc5‐siRNA质粒载体构建成功。结论成功构建了携带SLC基因的Birc5‐siRNA质粒，为进一步研究靶向沉默肿瘤Birc5基因并趋化淋巴细胞抗肿瘤研究提供了工具和基础。 |
| 关 键 词： | 次级淋巴组织趋化因子 Birc5 siRNA 肿瘤 |
Construction and Identification of Birc 5-siRNA Vector Carrying SLC Gene |
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| Abstract: | |
| Keywords: | secondary lymphoid-tissue chemokine Birc5 siRNA tumor |
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