真核表达东方马脑炎病毒衣壳蛋白Capsid抑制IFNγ应答基因转录 |
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引用本文: | 崔艳,刘海楠,李伟,李平,曹诚.真核表达东方马脑炎病毒衣壳蛋白Capsid抑制IFNγ应答基因转录[J].军事医学科学院院刊,2012,36(7):512-515. |
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作者姓名: | 崔艳 刘海楠 李伟 李平 曹诚 |
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作者单位: | 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 |
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摘 要: | 目的克隆东方马脑炎病毒(EEEV)衣壳蛋白(Capsid)基因,构建其真核表达载体,检测该基因在293细胞中的表达,并初步研究其对干扰素(IFN)应答基因表达的影响。方法构建包含EEEV capsid基因的真核表达载体pcDNA3-Flag-capsid,以威格拉斯脂质体转染293细胞进行瞬时表达,Western印迹检测其表达情况;应用定量PCR比较IFN效应基因Gbp1,Gbp2和Isg15在pcDNA3-Flag-capsid和空载体转染细胞中mRNA表达差异。结果构建了EEEV Capsid真核表达质粒,并且该质粒能够在293细胞中有效表达,同时定量PCR结果表明,与空载体转染对照组相比,外源导入EEEV Capsid抑制IFN应答基因Gbp1,Gbp2和Isg15的转录。结论真核表达EEEVCapsid抑制细胞内IFN应答基因的表达,为研究EEEV致病机制奠定基础。
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关 键 词: | 马脑炎病毒 东方 衣壳蛋白质类 真核表达 IFN应答基因 |
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