人GDDR基因启动子的克隆和报告基因载体构建 |
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引用本文: | 祁胜宾,双剑博,卢晓昭,杜建军.人GDDR基因启动子的克隆和报告基因载体构建[J].细胞与分子免疫学杂志,2011,27(2). |
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作者姓名: | 祁胜宾 双剑博 卢晓昭 杜建军 |
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作者单位: | 1. 第四军医大学西京消化病医院,陕西,西安,710032 2. 解放军第323医院肾内科,陕西,西安,710054 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 目的:克隆人GDDR基因的启动子;构建GDDR启动子的报告基因载体并进行活性分析.方法:设计合成GD-DR启动子引物,采用PCR技术从人基因组DNA中扩增GD-DR启动子;将扩增片段插入T载体并利用酶切与测序进行鉴定;亚克隆该基因至pGL3-Basic荧光报告基因载体;瞬时转染细胞,用双荧光素酶报告基因系统检测报告基因载体的活性.结果:PCR扩增得到人GDDR基因启动子;成功构建pGL3-GDDR-promoter 报告基因载体,测序结果表明启动子序列正确;双荧光素酶报告基因检测系统证实构建的报告基因载体具有启动子活性.结论:成功地构建人GDDR基因启动子的克隆及其报告基因载体的构建,为深入研究GDDR转录表达的调控机制提供基础.
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关 键 词: | 基因 启动子 荧光素酶报告基因 |
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