| 人睫状神经营养因子基因在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 黄晓明,胡向阳,高翼之. 人睫状神经营养因子基因在大肠杆菌中的表达[J]. 中华医学遗传学杂志, 1998, 0(2) |
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| 作者姓名： | 黄晓明 胡向阳 高翼之 |
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| 作者单位： | 南京铁道医学院医学科研所 |
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| 摘 要： | 目的克隆人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）基因，并在大肠杆菌宿主系统中高效表达出具有生物活性的ｈＣＮＴＦ蛋白。方法从人外周神经组织总ＲＮＡ经逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增得到编码人ＣＮＴＦ的全长ｃＤＮＡ片段，此片段经回收和纯化后克隆进ＰＧＥＭ－５Ｚｆ（＋）质粒载体，并进行了ＤＮＡ序列分析，然后进一步亚克隆进Ｔ７启动子表达载体，用ＩＰＴＧ在大肠杆菌宿主中诱导ｈＣＮＴＦ蛋白表达，并以体外培养的鸡胚背根神经节（ＤＲＧ）神经元测定了重组ｈＣＮＴＦ蛋白的神经营养活性。结果成功克隆了人ＣＮＴＦ基因，含重组ＣＮＴＦ质粒的大肠杆菌经０．４ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导３小时后，靶蛋白占细菌总蛋白的２５％以上。结论ｈＣＮＴＦ基因的克隆和高效表达为进一步研究其结构功能关系和临床应用打下了基础
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| 关 键 词： | 人睫状神经营养因子 基因克隆 基因表达 神经营养活性 |
EXPRESSION OF HUMAN CILIARY NEUROTROPHIC FACTOR GENE IN ESCHERICHIA COLI |
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| Huang Xiaoming ,Hu Xiangyang,Gao Yizhi. EXPRESSION OF HUMAN CILIARY NEUROTROPHIC FACTOR GENE IN ESCHERICHIA COLI[J]. Chinese journal of medical genetics, 1998, 0(2) |
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| Authors: | Huang Xiaoming Hu Xiangyang Gao Yizhi |
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| Affiliation: | Huang Xiaoming *,Hu Xiangyang,Gao Yizhi. *Institute of Medical Sciences,Nanjing Railway Medical College,Nanjing 210009 P.R.China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human ciliary neurotrophic factor Gene cloning Gene expression Neurotrophic activity |
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