| 益心解毒方对Nox2和Nox4亚基过表达的心肌细胞NADPH氧化酶活性的影响 |
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| 引用本文： | 解华,麻春杰,郭淑贞,张前,付帮泽,高阔,王伟. 益心解毒方对Nox2和Nox4亚基过表达的心肌细胞NADPH氧化酶活性的影响[J]. 北京中医药大学学报(中医临床版), 2015, 0(2): 24-28,61 |
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| 作者姓名： | 解华 麻春杰 郭淑贞 张前 付帮泽 高阔 王伟 |
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| 作者单位： | 1. 北京中医药大学 北京100029
2. 内蒙古医科大学 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，科技部重大新药创制，北京中医药大学自主选题 |
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| 摘 要： | 目的通过观察益心解毒方含药血清对Nox2、Nox4亚基过表达的H9c2心肌细胞NADPH氧化酶活性的影响,揭示其作用环节是否与干预相应亚型的NADPH氧化酶调控环节有关。方法采用PCR方法扩增Nox2、Nox4基因全长序列,经双酶切、连接载体和转化后提取重组质粒,经酶切鉴定的阳性质粒进行DNA测序,测序正确后按照lipofectamine 2000试剂的说明书瞬时转染H9c2细胞,转染后的心肌细胞分组给予不同的药物干预,24 h后检测NADPH氧化酶活性。结果 1含有Nox2/Nox4亚基的重组质粒载体通过测序鉴定,结果与Gen Bank报道的完全一致。2通过荧光显微镜下观察转染72 h后的H9c2细胞,可见大量发绿色荧光的细胞,流式细胞术计数结果显示转染率均在60%左右,符合实验要求。3空质粒载体组、模型组、益心解毒方组的NADPH氧化酶活性表达明显高于正常组(P<0.01,P<0.05);模型组和益心解毒方组的NADPH氧化酶活性表达高于空载体组(P<0.01);模型组NADPH氧化酶活性表达均明显高于其他各组,而益心解毒方各组的NADPH氧化酶活性表达均明显低于模型组(P<0.01,P<0.05)。结论成功构建大鼠心肌细胞Nox2、Nox4亚基的重组质粒载体,该重组质粒载体可以在心肌细胞中过表达,益心解毒方可以有效地降低NADPH氧化酶活性的表达。提示此复方治疗心衰的机制可能是抑制了Nox2和Nox4型NADPH氧化酶的表达。
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| 关 键 词： | 益心解毒方 H9c2心肌细胞 过表达 NADPH氧化酶活性 |
Effects of Yixin Jiedu Formula on NADPH oxidase activity in H9c2 myocardial cells with overexpressed Nox2 and Nox4 subunits |
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| XIE Hua,MA Chunjie,GUO Shuzhen,ZHANG Qian,FU Bangze,GAO Kuo,WANG Wei. Effects of Yixin Jiedu Formula on NADPH oxidase activity in H9c2 myocardial cells with overexpressed Nox2 and Nox4 subunits[J]. Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine, 2015, 0(2): 24-28,61 |
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| Authors: | XIE Hua MA Chunjie GUO Shuzhen ZHANG Qian FU Bangze GAO Kuo WANG Wei |
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| Affiliation: | XIE Hua;MA Chunjie;GUO Shuzhen;ZHANG Qian;FU Bangze;GAO Kuo;WANG Wei;Beijing University of Chinese Medicine;Inner Mongolia Medical University; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Yixin Jiedu Formula H9c2 cardiomyocytes overexpression NADPH oxidase activity |
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