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HIV-1Nef调节内皮细胞黏附分子ICAM-1的表达
引用本文:杨凡,刘朝奇,覃晓琳,吕佰瑞,周永芹,韩钰.HIV-1Nef调节内皮细胞黏附分子ICAM-1的表达[J].免疫学杂志,2010(3).
作者姓名:杨凡  刘朝奇  覃晓琳  吕佰瑞  周永芹  韩钰
作者单位:三峡大学分子生物学研究所;宜昌市第二人民医院;
基金项目:宜昌市科技发展计划项目(A2007108-02b02)
摘    要:目的研究HIV-1的调节基因Nef对ECV304细胞ICAM-1表达的影响,从而为分析HIV-1感染引起内皮细胞生物学活性的变化,以及为阐明Nef参与HIV-1致病的分子机制奠定基础。方法应用本实验室已经建立保存的HIV-1Nef基因在内皮细胞的稳定表达细胞株ECV304-Nef和其阴性对照细胞株ECV304 pcDNA 3.1(+),通过RT-PCR、实时定量PCR(real-time PCR)、Western blot、FCM和细胞黏附试验分析ECV304-Nef细胞ICAM-1的表达水平。结果 RT-PCR、real-time PCR结果显示ECV304-Nef细胞ICAM-1 mRNA表达水平明显升高,为对照组的(4.3±0.2)倍;Western blot结果示ECV304-Nef细胞I-CAM-1蛋白的表达水平高于对照组;FCM分析显示ECV304-Nef细胞和对照组细胞ICAM-1阳性细胞百分率分别为(35.3±2.2)%和(12.5±0.8)%(P0.01),两组间ICAM-1表达有显著差异。细胞黏附实验观察到ECV304-Nef细胞黏附的Jurkat细胞数明显多于对照组,荧光仪定量分析结果显示ECV304-Nef细胞黏附的Jurkat细胞的荧光强度值显著高与对照组(P0.05)。结论本实验证实了HIV-1Nef基因可以上调血管内皮细胞细胞黏附分子ICAM-1的表达。

关 键 词:HIV-1  Nef  ICAM-1  血管内皮细胞  

HIV-1Nef up-regulates the expression of adhesion molecule ICAM-1 on endothelial cells
YANG Fan,LIU Chaoqi,QIN Xiaolin,LV Bai rui,ZHOU Yongqing,HAN Yu Institute of Molecular Biology,Three Gorges University,Yichang ,China.HIV-1Nef up-regulates the expression of adhesion molecule ICAM-1 on endothelial cells[J].Immunological Journal,2010(3).
Authors:YANG Fan  LIU Chaoqi  QIN Xiaolin  LV Bai rui  ZHOU Yongqing  HAN Yu Institute of Molecular Biology  Three Gorges University  Yichang  China
Institution:YANG Fan,LIU Chaoqi,QIN Xiaolin,LV Bai rui,ZHOU Yongqing,HAN Yu Institute of Molecular Biology,Three Gorges University,Yichang 443000,China
Abstract:This study aimed to explore the effects of HIV-1 Nef on ICAM-1 over expression on the endothelial cells for investigating the molecule mechanism of HIV-1 Nef in AIDS pathogenesis.We utilized a stable Nef expressing cell line ECV304-Nef and its negative control cell line ECV304 pcDNA 3.1(+),which have been established and preserved in our laboratory,to measure ICAM-1 expression of ECV304-Nef by real-time PCR,Western blot,FCM and cellular adhesion assay.Compared with the control cells,the I-CAM-1 mRNA express...
Keywords:HIV-1 Nef  ICAM-1  Vascular endothelial cells  
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