切割瘢痕组织的TIMP-1核酶计算机辅助设计及体外表达载体的构建 |
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作者姓名: | 吴建明 郭静 林子豪 金由辛 |
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作者单位: | 吴建明(解放军第二军医大学长征医院,上海200003) 郭静(解放军第二军医大学长征医院,上海200003) 林子豪(解放军第二军医大学长征医院,上海200003) 金由辛(中国科学院上海生命化学与细胞生物学研究所) |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助(39970761);中国科学院重大项目(KJ951-B1-610) |
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摘 要: | 目的设计能特异性切割人类瘢痕组织中TIMP-1mRNA的核酶,为解决增生性瘢痕问题寻找新的基因治疗的途径。方法根据Symons的"锤头结构",以人TIMP-1的mRNA为靶RNA,用计算机对其可能成为核酶切割位点的部位进行分析以寻找最佳切点;对底物、核酶及嵌入U6snRNA后核酶的二级结构进行预测;依据分子生物学的克隆技术构建其体外高效表达载体。结果针对第123、299和353位点设计了3个核酶,均能与底物切点两翼碱基结合形成锤头结构,嵌入U6snRNA后,核酶与底物的结合能量变化不大。成功构建了核酶的高效表达载体。结论计算机辅助设计是研究核酶过程中不可或缺的重要步骤;核酶嵌入U6snRNA可能是解决目前核酶研究中存在问题的较好途径;TIMP-1mRNA上第123、299、353位可能是核酶的最佳切割位点。
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关 键 词: | TIMP-1 核酶 计算辅助设计 U6snRNA 表达载体 |
文章编号: | 1007-5496(2001)02-0054-02 |
修稿时间: | 2000-11-04 |
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