| 曼氏迭宫绦虫钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅰ(SmCaMK Ⅰ)基因的生物信息学分析与表达鉴定 |
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| 作者姓名： | 李奕基 陈新新 符瑞佳 陈小静 吕刚 梁培 |
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| 作者单位： | 1. 海南医学院热带病转化医学教育部重点实验室,海口571199;海南医学院热带医学与检验医学院,海口 571199;2. 海南医学院热带医学与检验医学院,海口,571199;3. 海南医学院热带病转化医学教育部重点实验室,海口571199;海南医学院热带医学与检验医学院,海口 571199;海南大学农学院,海口 570228 |
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| 基金项目： | the Natural Science Foundation of China(81560332 & 81260254)，the Natural Science Foundation of Hainan Province (No.814289)国家自然科学基金(81560332&81260254)，海南省自然科学基金(814289) |
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| 摘 要： | 目的 开展SmCaMK Ⅰ(曼氏迭宫绦虫钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅰ)的潜在生物学特征分析和功能研究.方法 利用相关网站和软件对SmCaMK Ⅰ的同源性核苷酸序列比对分析、保守位点预测、构建分子进化树、编码氨基酸的淋巴细胞表位进行分析预测.此外,SmCaMK Ⅰ进行扩增,并克隆到表达载体pET-28α(+)中进行蛋白的表达纯化,制备大鼠免疫血清进行虫体免疫组织定位分析.结果 SmCaMK Ⅰ是一个全长基因,由1 068 bp组成,编码355个氨基酸.SmCaMK Ⅰ与细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫的CaMK Ⅰ保守功能域的氨基酸序列一致性分别为89％和88％,与人的CaMK Ⅰ氨基酸序列一致性仅仅只有44 ％.分子进化树分析中SmCaMK Ⅰ与绦虫属的亲缘关系最近,与其他物种亲缘性较远.与人类CaMK Ⅰ相比,淋巴细胞表位具有统计学差异.SmCaMK Ⅰ能够定位在成虫的睾丸和虫卵,在裂头蚴中大量表达和特异定位于体表.结论 SmCaMK Ⅰ是参与虫体生长发育繁殖的重要蛋白分子,还可能是一个潜在的疫苗靶标蛋白.
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| 关 键 词： | 曼氏迭宫绦虫 SmCaMK Ⅰ 生物信息学分析 原核表达 免疫组织化学定位 |
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